Κύτταρα CAL27 - Εστιασμένες πληροφορίες για τον καρκίνο του κεφαλιού και του τραχήλου με τη χρήση κυττάρων CAL27

Το CAL27 είναι μία από τις πιο συχνά χρησιμοποιούμενες κυτταρικές σειρές καρκινώματος πλακωδών κυττάρων του στόματος στη βιοϊατρική έρευνα. Αποτελεί ένα πολύτιμο εργαλείο για τη μελέτη των περιπλοκών των καρκίνων πλακωδών κυττάρων, συμπεριλαμβανομένης της ανάπτυξης του όγκου, της εξέλιξής του και των υποκείμενων κυτταρικών και μοριακών μηχανισμών. Επιπλέον, διευκολύνει επίσης τον έλεγχο και τη δοκιμή φαρμάκων για την ανάπτυξη αντικαρκινικών φαρμάκων.

Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά των κυττάρων CAL27

Το πρώτο πράγμα που πρέπει να γνωρίζετε για μια κυτταρική σειρά είναι η προέλευσή της και τα γενικά χαρακτηριστικά που τη διακρίνουν από άλλες κυτταρικές σειρές. Αυτή η ενότητα του άρθρου περιλαμβάνει βασικές πληροφορίες σχετικά με τα κύτταρα CAL27. Θα μάθετε: Τι είναι το κυτταρικό μοντέλο CAL27; Τι είναι το CAL27 HPV; Ποια είναι η κατάσταση HER2 του CAL27; Ποια είναι η προέλευση της κυτταρικής σειράς CAL27; Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων CAL27; Ποιο είναι το μέγεθος των κυττάρων CAL27;

• Η κυτταρική σειρά καρκίνου των πλακωδών κυττάρων του στόματος, CAL27, αναπτύχθηκε από ιστό γλώσσας ενός 56χρονου λευκού άνδρα που παρουσίαζε καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων της γλώσσας. Η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε το 1982 από τον Gioanni και τους συνεργάτες του [1].
• Τα καρκινικά κύτταρα CAL27 παρουσιάζουν επιθηλιακή μορφολογία.
• Αυτά τα κύτταρα έχουν ανευπλοειδή καρυότυπο. Έχουν μέσο αριθμό χρωμοσωμάτων 43.

Μια σειρά από πλακώδη επιθηλιακά κύτταρα που παρατηρούνται στο μικροσκόπιο.

Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς CAL27

Για την εύκολη και εφικτή συντήρηση της κυτταρικής σειράς, πρέπει να γνωρίζετε τις βασικές απαιτήσεις καλλιέργειας κυττάρων. Αυτή η ενότητα καλύπτει τις σημαντικές έννοιες καλλιέργειας κυττάρων σχετικά με την κυτταρική σειρά CAL27. Πρέπει να γνωρίζετε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού της κυτταρικής σειράς CAL27; Τι είναι το κυτταρικό μέσο CAL27; Ποιος είναι ο λόγος υποκαλλιέργειας της κυτταρικής σειράς CAL27; Ποιες είναι οι συνθήκες καλλιέργειας της CAL27; Πώς καλλιεργείτε τα κύτταρα CAL27;

Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων CAL27

Χρόνος διπλασιασμού:

Τα κύτταρα CAL27 παρουσιάζουν μέτριο ρυθμό ανάπτυξης με χρόνο διπλασιασμού του πληθυσμού περίπου 45 ώρες.

Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:

Αυτά τα πολυγωνικά κύτταρα CAL27 προσκολλώνται στην επιφάνεια του δοχείου καλλιέργειας και αναπτύσσονται σε μονοστρωματικές καλλιέργειες.

Αναλογία διαίρεσης:

Τα κύτταρα CAL27 υποκαλλιεργούνται με αναλογία διαίρεσης 1:2 έως 1:4. Για την υποκαλλιέργεια, τα προσκολλημένα κύτταρα πλένονται με φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα χωρίς μαγνήσιο και ασβέστιο (1x). Στη συνέχεια, τα κύτταρα επωάζονται με Accutase (διάλυμα μεταμόσχευσης) σε θερμοκρασία περιβάλλοντος για 8 έως 10 λεπτά. Στα αποκολλημένα κύτταρα προστίθεται φρέσκο μέσο και φυγοκεντρείται. Το συλλεγόμενο ίζημα στη συνέχεια επαναδιαλύεται προσεκτικά και χύνεται σε νέες φιάλες που περιέχουν μέσο ανάπτυξης.

Μέσο ανάπτυξης:

Για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς CAL27 χρησιμοποιείται μέσο DMEM συμπληρωμένο με 10% FBS, 4,5 g/L γλυκόζη, 4 mM L-γλουταμίνη, 1,5 g/L NaHCO3 και 1,0 mM πυρουβικό νάτριο. Τα μέσα πρέπει να αντικαθίστανται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.

Συνθήκες ανάπτυξης:

Οι καλλιέργειες κυττάρων CAL27 διατηρούνται στους 37 °C σε υγραντικό επωαστήρα με παροχή 5% CO2.

Αποθήκευση:

Τα κατεψυγμένα κύτταρα CAL27 διατηρούνται είτε στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου είτε σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C σε καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλής θερμοκρασίας για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα.

Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:

Για την κατάψυξη των κυττάρων CAL27 συνιστάται η χρήση μέσου κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF. Για το σκοπό αυτό, συνιστάται μια διαδικασία αργής κατάψυξης που επιτρέπει μείωση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1 °C ανά λεπτό, προκειμένου να προστατευθεί η βιωσιμότητα των κυττάρων.

Διαδικασία απόψυξης:

Τα φιαλίδια με τα κατεψυγμένα κύτταρα τοποθετούνται σε υδατόλουτρο προρυθμισμένο στους 37 °C για 40-60 δευτερόλεπτα, έως ότου απομείνει ένας μικρός σβώλος πάγου. Στα κύτταρα προστίθεται φρέσκο μέσο και φυγοκεντρίζονται. Στη συνέχεια, αφαιρείται το μέσο κατάψυξης και στο ίζημα των κυττάρων προστίθεται φρέσκο μέσο ανάπτυξης και ανασυσσωματώνεται προσεκτικά. Στη συνέχεια, τα κύτταρα μεταφέρονται σε νέες φιάλες για ανάπτυξη.

Επίπεδο βιοασφάλειας:

Για τον χειρισμό και τη συντήρηση της κυτταρικής καλλιέργειας CAL27 απαιτούνται εργαστηριακές συνθήκες βιοασφάλειας επιπέδου 1.

 

Λεπτομερής απεικόνιση των κυττάρων CAL27 με μεγέθυνση 10x και 20x, όπου διακρίνεται η περίπλοκη πολυγωνική δομή τους.

Κυτταρική σειρά CAL27: Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα

Η CAL27 είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη κυτταρική σειρά καρκινώματος πλακωδών κυττάρων του στόματος. Σε αυτή την ενότητα θα επισημανθούν ορισμένα σημαντικά πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα που σχετίζονται με αυτά τα καρκινικά κύτταρα.

Πλεονεκτήματα

Τα κύρια πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς CAL27 είναι:

Ογκογένεση

Η κυτταρική σειρά CAL27 έχει ογκογόνο δυναμικό. Αυτά τα κύτταρα μπορούν να αναπτύξουν όγκους όταν εγχυθούν σε γυμνά ή ανοσοκατεσταλμένα ποντίκια. Αυτό μπορεί να βοηθήσει τους ερευνητές να κατανοήσουν σε βάθος τη βιολογία του όγκου και το μικροπεριβάλλον.

Γενετικές μεταλλάξεις

Τα κύτταρα CAL27 φέρουν συγκεκριμένες γονιδιακές μεταλλάξεις, όπως το CAL27 P53, που εμφανίζονται συχνά στο καρκίνωμα των πλακωδών κυττάρων του στόματος. Επομένως, η χρήση του CAL27 μπορεί να είναι επωφελής για τους ερευνητές που μελετούν την επίδραση αυτών των μεταλλάξεων στην ανάπτυξη, την εξέλιξη και την πρόοδο του καρκίνου.

Εύκολη καλλιέργεια

Η στοματική πλακώδης κυτταρική σειρά, CAL27, δεν έχει απαιτητικές απαιτήσεις καλλιέργειας κυττάρων. Επομένως, είναι εύκολο να καλλιεργηθεί και να διατηρηθεί σε ερευνητικά εργαστήρια.

 

Μειονεκτήματα

Τα μειονεκτήματα που σχετίζονται με τη κυτταρική σειρά CAL27 είναι:

Μοντέλο in vitro

Τα κύτταρα CAL27 χρησιμεύουν ως in vitro μοντέλο του καρκίνου των πλακωδών κυττάρων του στόματος. Ωστόσο, είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι ενδέχεται να μην αντικατοπτρίζουν με ακρίβεια τα χαρακτηριστικά και την πολυπλοκότητα των αρχικών όγκων πλακωδών κυττάρων.

 

Εφαρμογές των κυττάρων CAL27 στην έρευνα

Η κυτταρική σειρά CAL27 έχει ένα ευρύ φάσμα εφαρμογών στη βιοϊατρική έρευνα. Μερικές από τις σημαντικές ερευνητικές χρήσεις παρατίθενται εδώ.

• Βιολογία του καρκίνου: Τα κύτταρα CAL27 έχουν χρησιμοποιηθεί ευρέως για τη διερεύνηση των μοριακών και κυτταρικών μηχανισμών που υποκρύπτονται στην ανάπτυξη και την εξέλιξη του καρκίνου των πλακωδών κυττάρων του στόματος (OSCC). Οι ερευνητές μελετούν επίσης γενετικές μεταλλάξεις, οδούς σηματοδότησης και σημαντικούς βιοδείκτες που σχετίζονται με τους όγκους των πλακωδών κυττάρων. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2021 χρησιμοποίησε κύτταρα CAL27 και διερεύνησε τον ρόλο του CD147 στην ανάπτυξη του καρκίνου των πλακωδών κυττάρων του στόματος. Τα αποτελέσματα της μελέτης έδειξαν ότι η καταστολή του CD147 προκάλεσε αναστολή του πολλαπλασιασμού, της μετανάστευσης και της εισβολής των κυττάρων CAL27. Επιπλέον, η καταστολή του εμποδίζει επίσης την ανάπτυξη αντοχής στα φάρμακα στα καρκινικά κύτταρα [2].
• Ανάπτυξη φαρμάκων: Η κυτταρική σειρά CAL27 χρησιμεύει ως πολύτιμο εργαλείο για τον έλεγχο και τη δοκιμή αντικαρκινικών φαρμάκων. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για να ελέγξουν την αποτελεσματικότητα διαφόρων χημειοθεραπευτικών παραγόντων, στοχευμένων θεραπειών και πειραματικών φαρμάκων στην αναστολή του πολλαπλασιασμού, της ανάπτυξης και της βιωσιμότητας των καρκινικών κυττάρων του στόματος. Επιπλέον, η ρυθμιστική επίδραση των πιθανών αντικαρκινικών παραγόντων έχει επίσης αξιολογηθεί στις δυσλειτουργικές οδούς σηματοδότησης των καρκινικών κυττάρων. Αυτό μπορεί να βοηθήσει στην ανάπτυξη αποτελεσματικών και εξατομικευμένων θεραπειών για την καταπολέμηση της νόσου. Μια μελέτη διερεύνησε το αντικαρκινικό δυναμικό των νανοσωματιδίων οξειδίου του ψευδαργύρου χρησιμοποιώντας κύτταρα CAL27. Τα ευρήματα της μελέτης αποκάλυψαν ότι τα νανοσωματίδια οξειδίου του ψευδαργύρου παρήγαγαν κυτταροτοξικές επιδράσεις και επίσης προκάλεσαν τη μιτοφαγία που μεσολαβείται από την οδό PINK1/Parkin σε κύτταρα καρκίνου της γλώσσας CAL27 [3]. Ομοίως, οι ερευνητές παρατήρησαν το αντικαρκινικό δυναμικό της δοξορουβικίνης και της νανοσυνθετικής μορφής της (Doxil) στον καρκίνο των πλακωδών κυττάρων του στόματος CAL27 [4].

5. Δημοσιεύσεις που αφορούν τη κυτταρική σειρά CAL27

Αυτό το τμήμα του άρθρου θα καλύψει μερικές ενδιαφέρουσες και πιο συχνά αναφερόμενες δημοσιεύσεις σχετικά με τα καρκινικά κύτταρα CAL27:

Αναστολή των κυττάρων του καρκίνου του στόματος τύπου πλακώδους καρκινώματος CAL27 μέσω της στόχευσης της οδού Hedgehog με vismodegib ή itraconazole

Η έρευνα αυτή δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Frontiers in Oncology (2020). Η μελέτη διερεύνησε τις αντι-καρκινικές επιδράσεις του vismodegib ή της ιτρακοναζόλης στο καρκίνο των πλακωδών κυττάρων του στόματος χρησιμοποιώντας κύτταρα CAL27.  

Το PLAU προάγει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων και την επιθηλιο-μεσεγχυματική μετάπτωση στο πλακώδες καρκίνωμα του κεφαλιού και του τραχήλου

Αυτό το άρθρο στο περιοδικό Frontiers in Genetics (2021) πρότεινε ότι η πρωτεΐνη ενεργοποιητή πλασμινογόνου, ουροκινάση (PLAU), ενθαρρύνει τον πολλαπλασιασμό, τη μετανάστευση και την επιθηλιο-μεσεγχυματική μετάπτωση (EMT) των κυττάρων CAL27.

Το microRNA-145-5p επιδεινώνει την απόπτωση των κυττάρων και το οξειδωτικό στρες στο πλακώδες καρκίνωμα της γλώσσας

Αυτό το άρθρο στο Experimental and Therapeutic Medicine (2021) διαπίστωσε ότι το miRNA-145-5p επιδεινώνει το οξειδωτικό στρες και τον θάνατο των κυττάρων CAL27 και καταστέλλει την οδό σηματοδότησης PI3K/AKT.

Αντικαρκινική δράση του φυτικού εκχυλίσματος μορίνης σε κύτταρα καρκινώματος πλακωδών κυττάρων της γλώσσας

Αυτή η μελέτη στο περιοδικό Oncology Reports (2018) διερεύνησε την αντικαρκινική δράση ενός βιοφλαβονοειδούς που ονομάζεται μορίνη, χρησιμοποιώντας κύτταρα CAL27.

Μείωση των στοματικών παθογόνων και της οξειδωτικής βλάβης στη κυτταρική σειρά CAL 27 από εκχυλίσματα Rosmarinus officinalis L. και Taraxacum officinale Web.

Αυτό το άρθρο στο Journal of Ethnopharmacology (2023) διερεύνησε το θεραπευτικό δυναμικό των εκχυλισμάτων Rosmarinus officinalis L. και Taraxacum officinale σε κύτταρα CAL27.

Πόροι για τη σειρά κυττάρων CAL27: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Υπάρχουν περιορισμένοι διαθέσιμοι πόροι για τη κυτταρική σειρά CAL27. Σε αυτή την ενότητα, έχουμε καταγράψει μερικά γενικά πρωτόκολλα που μπορούν επίσης να σας βοηθήσουν να χειριστείτε τα κύτταρα CAL27:

• Μεταφορά γονιδίου σε κύτταρα CAL27: Αυτό το βίντεο θα σας βοηθήσει να μάθετε ένα γενικό πρωτόκολλο για τη μεταφορά πλασμιδιακού DNA.
• Υποκαλλιέργεια προσκολλητικών κυττάρων: Αυτό το βίντεο θα σας καθοδηγήσει αναλυτικά σχετικά με την υποκαλλιέργεια προσκολλητικών κυτταρικών σειρών.

Ο παρακάτω σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων CAL27.

• Κυτταρική σειρά CAL27: Αυτός ο ιστότοπος περιέχει πληροφορίες σχετικά με τα μέσα καλλιέργειας CAL27, την πυκνότητα σποράς, τον χρόνο διπλασιασμού κ.λπ. Επιπλέον, περιέχει ένα πρωτόκολλο για την υποκαλλιέργεια και τον χειρισμό πολλαπλασιαζόμενων και κρυοσυντηρημένων καλλιεργειών.

Αναφορές

1. Liu, X., et al., Το LINC00472 καταστέλλει την ανάπτυξη του καρκίνου των πλακωδών κυττάρων του στόματος στοχεύοντας τον άξονα miR-455-3p/ELF3. Bioengineered, 2022. 13(1): σ. 1162-1173.
2. Pan, S., et al., Η απενεργοποίηση του CD147 αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό, την εισβολή και την αντοχή στα φάρμακα των ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων του στόματος CAL27 in vitro και in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: σ. 378-389.
3. Wang, J., et al., Τα νανοσωματίδια οξειδίου του ψευδαργύρου προκαλούν τοξικότητα σε κυτταρικές σειρές καρκίνου του στόματος CAL 27 ενεργοποιώντας τη μιτοφαγία που μεσολαβείται από PINK1/Parkin. International Journal of Nanomedicine, 2018: σ. 3441-3450.
4. Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen, και A.M.S. Eldeen, Η νανοδοξορουβικίνη με επικάλυψη λιποσωμάτων προκαλεί απόπτωση σε κύτταρα καρκινώματος πλακωδών κυττάρων του στόματος CAL-27. Archives of oral biology, 2019. 103: σ. 47-54.