CAL27 Hücreleri - CAL27 Hücreleri Kullanılarak Baş ve Boyun Kanseri Üzerine Derinlemesine Analiz

CAL27, biyomedikal araştırmalarda en sık kullanılan oral skuamöz hücreli karsinom hücre hatlarından biridir. Tümör büyümesi, gelişimi ve altta yatan hücresel ve moleküler mekanizmalar dahil olmak üzere skuamöz hücreli kanserlerin karmaşıklığını incelemek için değerli bir araçtır. Ayrıca, anti-kanser ilaç geliştirme için ilaç taraması ve testlerini de kolaylaştırır.

CAL27 hücrelerinin kökeni ve genel özellikleri

Bir hücre hattı hakkında bilmeniz gereken ilk şey, onu diğer hücre hatlarından ayıran kökeni ve genel özellikleridir. Makalenin bu bölümü, CAL27 hücreleri hakkında temel bilgileri içermektedir. Öğrenecekleriniz: CAL27 hücre modeli nedir? CAL27 HPV nedir? CAL27 HER2 durumu nedir? CAL27 hücre hattının kökeni nedir? CAL27 hücrelerinin morfolojisi nedir? CAL27 hücre boyutu nedir?

• Ağız skuamöz hücreli kanser hücre hattı olan CAL27, dil skuamöz hücreli karsinom hastalığı olan 56 yaşındaki beyaz bir erkeğin dil dokusundan geliştirilmiştir. Hücre hattı, 1982 yılında Gioanni ve meslektaşları tarafından kurulmuştur [1].
• CAL27 kanser hücreleri, epitel benzeri bir morfoloji sergiler.
• Bu hücreler anöploid karyotipe sahiptir. Modal kromozom sayısı 43'tür.

Mikroskop altında gözlemlenen bir dizi yassı epitel hücresi.

CAL27 hücre hattı hakkında kültür bilgileri

Hücre hattının bakımını kolay ve uygulanabilir bir şekilde yapmak için, temel hücre kültürü gereksinimlerini bilmeniz gerekir. Bu bölüm, CAL27 hücre hattı ile ilgili önemli hücre kültürü kavramlarını ele almaktadır. Bilmeniz gerekenler: CAL27 hücre hattının ikiye katlanma süresi nedir? CAL27 hücre besiyeri nedir? CAL27 hücre hattının alt kültürleme oranı nedir? CAL27 kültür koşulları nelerdir? CAL27 hücreleri nasıl kültürlenir?

CAL27 Hücrelerini Kültüre Etmenin Temel Noktaları

Çoğalma Süresi:

CAL27 hücreleri, yaklaşık 45 saatlik bir popülasyon ikiye katlanma süresi ile orta düzeyde bir büyüme hızı sergiler.

Yapışkan veya Süspansiyon Halinde:

Bu poligonal CAL27 hücreleri, kültür kabının yüzeyine yapışır ve tek tabaka halinde büyür.

Bölünme oranı:

CAL27 hücreleri 1:2 ila 1:4 bölünme oranında alt kültürlenir. Alt kültürleme için, yapışkan hücreler magnezyum ve kalsiyum içermeyen fosfat tamponlu salin (1x) ile yıkanır. Daha sonra hücreler, oda sıcaklığında 8 ila 10 dakika boyunca Accutase (pasajlama çözeltisi) ile inkübe edilir. Ayrılan hücrelere taze besiyeri eklenir ve santrifüjlenir. Toplanan pelet daha sonra dikkatlice yeniden süspansiyon haline getirilir ve büyüme besiyeri içeren yeni şişelere dökülür.

Büyüme Ortamı:

CAL27 hücre hattını kültürlemek için %10 FBS, 4,5 g/L glikoz, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3 ve 1,0 mM sodyum piruvat ile takviye edilmiş DMEM besiyeri kullanılır. Besiyeri haftada 2 ila 3 kez değiştirilmelidir.

Büyüme Koşulları:

CAL27 hücre kültürleri, %5 CO2 beslemeli nemlendirilmiş bir inkübatörde 37°C'de tutulur.

Saklama:

Dondurulmuş CAL27 hücreleri, sıvı azotun buhar fazında veya daha uzun süreli saklama için -150°C'nin altındaki sıcaklıkta ultra düşük sıcaklıklı bir dondurucuda tutulur.

Dondurma Süreci ve Ortamı:

CAL27 hücrelerini dondurmak için CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamı önerilir. Bunun için, hücrelerin canlılığını korumak amacıyla dakikada sadece 1 °C'lik bir sıcaklık düşüşüne izin veren yavaş bir dondurma işlemi önerilir.

Çözme Süreci:

Dondurulmuş hücre şişeleri, küçük bir buz topakçığı kalana kadar 40-60 saniye boyunca önceden 37°C'ye ayarlanmış bir su banyosuna yerleştirilir. Hücrelere taze ortam eklenir ve santrifüjlenir. Ardından, dondurma ortamı uzaklaştırılır ve hücre peletine taze büyüme ortamı eklenir ve dikkatlice yeniden süspansiyon haline getirilir. Hücreler daha sonra büyüme için yeni şişelere aktarılır.

Biyogüvenlik Seviyesi:

CAL27 hücre kültürünün işlenmesi ve bakımı için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvar ortamı gereklidir.

 

CAL27 hücrelerinin 10x ve 20x büyütmede yakından görünümü; hücrelerin karmaşık çokgen yapısı açıkça görülmektedir.

CAL27 hücre hattı: Avantajlar ve Dezavantajlar

CAL27, yaygın olarak kullanılan bir oral skuamöz hücreli karsinom hücre hattıdır. Bu bölümde, bu kanser hücreleriyle ilgili bazı önemli avantaj ve dezavantajlar ele alınacaktır.

Avantajlar

CAL27 hücre hattının başlıca avantajları şunlardır:

Tümörijeniklik

CAL27 hücre hattı, tümör oluşturma potansiyeline sahiptir. Bu hücreler, çıplak veya bağışıklık sistemi zayıflamış farelere enjekte edildiğinde tümörler geliştirebilir. Bu, araştırmacıların tümör biyolojisini ve mikroortamını derinlemesine anlamalarına yardımcı olabilir.

Genetik Mutasyonlar

CAL27 hücreleri, oral skuamöz hücreli karsinomda yaygın olarak görülen CAL27 P53 gibi spesifik genomik değişikliklere sahiptir. Bu nedenle, CAL27'yi kullanmak, bu mutasyonların kanser büyümesi, gelişimi ve ilerlemesi üzerindeki etkisini inceleyen araştırmacılar için avantajlı olabilir.

Kültürlenmesi Kolay

Ağız skuamöz hücre hattı CAL27, hücre kültürü açısından zorlu gereksinimlere sahip değildir. Bu nedenle, araştırma laboratuvarlarında kültürü ve bakımı kolaydır.

 

Dezavantajlar

CAL27 hücre hattıyla ilişkili dezavantajlar şunlardır:

İn Vitro Model

CAL27 hücreleri, oral skuamöz hücreli karsinomun in vitro modeli olarak işlev görür. Ancak, bu hücrelerin orijinal skuamöz hücreli tümörlerin özelliklerini ve karmaşıklığını tam olarak yansıtmayabileceğini belirtmek önemlidir.

 

Araştırmada CAL27 hücrelerinin uygulamaları

CAL27 hücre hattı, biyomedikal araştırmalarda geniş bir uygulama alanına sahiptir. Önemli araştırma kullanımlarından bazıları burada listelenmiştir.

• Kanser Biyolojisi: CAL27 hücreleri, oral skuamöz hücreli karsinomun (OSCC) gelişimi ve ilerlemesinin altında yatan moleküler ve hücresel mekanizmaları araştırmak için yaygın olarak kullanılmaktadır. Araştırmacılar ayrıca skuamöz hücreli tümörlerle ilgili genetik mutasyonları, sinyal yolaklarını ve önemli biyobelirteçleri de incelemektedir. 2021 yılında yapılan bir çalışmada CAL27 hücreleri kullanılarak, oral skuamöz hücreli kanserin gelişiminde CD147'nin rolü araştırılmıştır. Çalışma sonuçları, CD147'nin baskılanmasının CAL27 hücrelerinin çoğalmasını, göçünü ve istilasını engellediğini göstermiştir. Ayrıca, CD147'nin aşağı regülasyonu, kanser hücrelerinde ilaç direncinin gelişmesini de engellemektedir [2].
• İlaç Geliştirme: CAL27 hücre hattı, anti-tümör ilaçlarının taranması ve test edilmesi için değerli bir araç görevi görmektedir. Araştırmacılar, bu hücreleri, çeşitli kemoterapötik ajanların, hedefe yönelik tedavilerin ve deneysel ilaçların ağız kanseri hücrelerinin çoğalmasını, büyümesini ve canlılığını inhibe etmedeki etkinliğini test etmek için kullanmaktadır. Ayrıca, potansiyel anti-kanser ajanlarının düzenleyici etkisi, düzensizleşmiş kanser hücresi sinyal yolları üzerinde de değerlendirilmiştir. Bu, hastalıkla mücadele için etkili ve kişiselleştirilmiş tedavilerin geliştirilmesine yardımcı olabilir. Bir çalışmada, CAL27 hücreleri kullanılarak çinko oksit nanopartiküllerinin anti-tümör potansiyeli araştırılmıştır. Çalışma bulguları, çinko oksit nanopartiküllerinin sitotoksik etkiler ürettiğini ve ayrıca CAL27 dil kanseri hücrelerinde PINK1/Parkin yolak aracılı mitofajiyi indüklediğini ortaya koymuştur [3]. Benzer şekilde, araştırmacılar, CAL27 ağız skuamöz hücreli kanseri üzerinde doksorubisin ve nano formülasyonlu hali (Doxil) üzerindeki anti-kanser potansiyelini gözlemlemiştir [4].

5. CAL27 hücre hattını ele alan yayınlar

Makalenin bu bölümünde, CAL27 kanser hücreleri ile ilgili ilginç ve en çok atıf alan birkaç yayın ele alınacaktır:

Vismodegib veya itrakonazol ile hedgehog yolunu hedefleyerek CAL27 oral skuamöz karsinom hücresinin inhibisyonu

Bu araştırma, Frontiers in Oncology (2020) dergisinde yayınlanmıştır. Çalışma, CAL27 hücrelerini kullanarak vismodegib veya itrakonazolün ağız skuamöz hücreli kansere karşı etkilerini araştırmıştır.  

PLAU, baş ve boyun skuamöz hücreli karsinomda hücre proliferasyonunu ve epitelyal-mezenkimal geçişi teşvik eder

Frontiers in Genetics (2021) dergisinde yayınlanan bu makale, plazminojen aktivatörü, ürokinaz (PLAU) proteininin, CAL27 hücrelerinin proliferasyonunu, göçünü ve epitelyal-mezenkimal geçişini (EMT) teşvik ettiğini öne sürmüştür.

MikroRNA-145-5p, dil skuamöz hücreli karsinomda hücre apoptozunu ve oksidatif stresi şiddetlendirir

Experimental and Therapeutic Medicine (2021) dergisinde yayınlanan bu makale, miRNA-145-5p'nin CAL27 hücrelerinin oksidatif stresini ve ölümünü şiddetlendirdiğini ve PI3K/AKT sinyal yolunu baskıladığını ortaya koymuştur.

Dil skuamöz hücreli karsinom hücrelerinde bitki özütü morinin antitümör aktivitesi

Oncology Reports (2018) dergisinde yayınlanan bu çalışma, CAL27 hücrelerini kullanarak morin adlı bir bioflavonoidin antikanser aktivitesini araştırmıştır.

Rosmarinus officinalis L. ve Taraxacum officinale Web özütlerinin CAL 27 hücre hattında ağız patojenlerini ve oksidatif hasarı azaltması

Journal of Ethnopharmacology (2023) dergisinde yayınlanan bu makale, Rosmarinus officinalis L. ve Taraxacum officinale özütlerinin CAL27 hücreleri üzerindeki terapötik potansiyelini araştırmıştır.

CAL27 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

CAL27 hücre hattı hakkında sınırlı sayıda kaynak bulunmaktadır. Bu bölümde, CAL27 hücreleriyle çalışmanıza yardımcı olabilecek bazı genel protokolleri listeledik:

• CAL27 hücre transfeksiyonu: Bu video, plazmid DNA transfeksiyonu için genel bir protokol öğrenmenize yardımcı olacaktır.
• Yapışkan hücrelerin alt kültürlenmesi: Bu video, yapışkan hücre hatlarının alt kültürlenmesi konusunda size kapsamlı bir rehberlik edecektir.

Aşağıdaki bağlantı, CAL27 hücre kültürü protokolünü içerir.

• CAL27 hücre hattı: Bu web sitesi, CAL27 besiyeri, tohumlama yoğunluğu, ikiye katlanma süresi vb. hakkında bilgiler içerir. Ayrıca, çoğalan ve kriyoprezervasyonlu kültürlerin alt kültürlenmesi ve işlenmesi için bir protokol içerir.

Referanslar

1. Liu, X., et al., LINC00472, miR-455-3p/ELF3 eksenini hedefleyerek oral skuamöz hücreli karsinomun büyümesini baskılar. Bioengineered, 2022. 13(1): s. 1162-1173.
2. Pan, S., et al., CD147'nin nakavt edilmesi, insan oral kanseri CAL27 hücrelerinin in vitro ve in vivo olarak çoğalmasını, istilasını ve ilaç direncini inhibe eder. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: s. 378-389.
3. Wang, J. ve ark., Çinko oksit nanopartiküller, PINK1/Parkin aracılı mitofajiyi aktive ederek CAL 27 ağız kanseri hücre hatlarında toksisiteye neden olur. International Journal of Nanomedicine, 2018: s. 3441-3450.
4. Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen ve A.M.S. Eldeen, Lipozom kaplı nano doksorubisin, ağız skuamöz hücreli karsinom CAL-27 hücrelerinde apoptozu indükler. Ağız Biyolojisi Arşivleri, 2019. 103: s. 47-54.