Células CAL27 - Análises aprofundadas sobre o cancro da cabeça e pescoço utilizando células CAL27

A CAL27 é uma das linhas celulares de carcinoma espinocelular oral mais frequentemente utilizadas na investigação biomédica. É uma ferramenta valiosa para estudar as complexidades dos cancros de células escamosas, incluindo o crescimento e desenvolvimento do tumor, bem como os mecanismos celulares e moleculares subjacentes. Além disso, facilita também a triagem e o teste de fármacos para o desenvolvimento de medicamentos anticancerígenos.

Origem e características gerais das células CAL27

A primeira coisa que precisa de saber sobre uma linha celular é a sua origem e as características gerais que a distinguem de outras linhas celulares. Esta secção do artigo abrange informações básicas sobre as células CAL27. Irá aprender: O que é o modelo celular CAL27? O que é o HPV CAL27? Qual é o estado HER2 das células CAL27? Qual é a origem da linha celular CAL27? Qual é a morfologia das células CAL27? Qual é o tamanho das células CAL27?

• A linha celular de cancro de células escamosas orais, CAL27, foi desenvolvida a partir do tecido da língua de um homem branco de 56 anos que apresentava carcinoma de células escamosas da língua. A linha celular foi estabelecida em 1982 por Gioanni e os seus colegas [1].
• As células cancerígenas CAL27 apresentam uma morfologia de tipo epitelial.
• Estas células têm um cariótipo aneuploide. Possuem um número modal de cromossomas de 43.

Uma camada de células epiteliais escamosas observadas ao microscópio.

Informações sobre o cultivo da linha celular CAL27

Para uma manutenção fácil e viável da linha celular, é necessário conhecer os seus principais requisitos de cultura celular. Esta secção aborda os conceitos importantes de cultura celular relativos à linha celular CAL27. Deve saber: Qual é o tempo de duplicação da linha celular CAL27? O que é o meio de cultura celular CAL27? Qual é a taxa de subcultura da linha celular CAL27? Quais são as condições de cultura da CAL27? Como se cultivam as células CAL27?

Pontos-chave para a cultura de células CAL27

Tempo de duplicação:

As células CAL27 apresentam uma taxa de crescimento moderada, com um tempo de duplicação da população de aproximadamente 45 horas.

Adesivas ou em suspensão:

Estas células CAL27 poligonais aderem à superfície do recipiente de cultura e crescem em monocamadas.

Rácio de divisão:

As células CAL27 são subcultivadas com uma proporção de divisão de 1:2 a 1:4. Para o subcultivo, as células aderentes são lavadas com solução salina tamponada com fosfato isenta de magnésio e cálcio (1x). Posteriormente, as células são incubadas com Accutase (solução de passagem) à temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos. As células desprendidas são adicionadas a meio fresco e centrifugadas. O sedimento recolhido foi então cuidadosamente ressuspenso e vertido em novos frascos contendo meio de crescimento.

Meio de crescimento:

Para a cultura da linha celular CAL27, utiliza-se meio DMEM suplementado com 10% de FBS, 4,5 g/L de glicose, 4 mM de L-glutamina, 1,5 g/L de NaHCO3 e 1,0 mM de piruvato de sódio. O meio deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana.

Condições de crescimento:

As culturas de células CAL27 são mantidas a 37 °C numa incubadora humidificada com um fornecimento de 5% de CO2.

Armazenamento:

As células CAL27 congeladas são mantidas na fase de vapor de nitrogénio líquido ou a uma temperatura inferior a -150 °C num congelador de temperatura ultrabaixa por períodos mais longos.

Processo de congelação e meio:

Recomenda-se a utilização do meio de congelamento CM-1 ou CM-ACF para congelar as células CAL27. Para tal, recomenda-se um processo de congelamento lento que permita apenas uma descida de 1 °C na temperatura por minuto, a fim de proteger a viabilidade das células.

Processo de descongelação:

Os frascos de células congeladas são colocados num banho-maria pré-ajustado a 37 °C durante 40-60 segundos, até restar apenas um pequeno pedaço de gelo. As células são adicionadas a meio fresco e centrifugadas. Posteriormente, o meio de congelação é removido e o sedimento celular é adicionado a meio de crescimento fresco e cuidadosamente ressuspenso. As células são então distribuídas em novos frascos para crescimento.

Nível de biossegurança:

São necessárias instalações laboratoriais de nível de biossegurança 1 para o manuseamento e manutenção da cultura celular CAL27.

 

Imagem detalhada das células CAL27 com ampliações de 10x e 20x, destacando a sua complexa estrutura poligonal.

Linha celular CAL27: vantagens e desvantagens

A CAL27 é uma linha celular de carcinoma espinocelular oral amplamente utilizada. Esta secção irá destacar algumas vantagens e desvantagens significativas relacionadas com estas células cancerígenas.

Vantagens

As principais vantagens da linha celular CAL27 são:

Tumorigenicidade

A linha celular CAL27 tem potencial tumorigénico. Estas células podem desenvolver tumores quando injetadas em ratos nude ou imunocomprometidos. Isto pode ajudar os investigadores a compreender em profundidade a biologia do tumor e o microambiente.

Mutações genéticas

As células CAL27 apresentam alterações genómicas específicas, tais como CAL27 P53, que ocorrem frequentemente no carcinoma de células escamosas oral. Assim, a utilização da CAL27 pode ser vantajosa para os investigadores que estudam o impacto destas mutações no crescimento, desenvolvimento e progressão do cancro.

Fácil de cultivar

A linha celular de células escamosas orais, CAL27, não tem requisitos de cultura celular exigentes. Assim, é fácil de cultivar e manter em laboratórios de investigação.

 

Desvantagens

As desvantagens associadas à linha celular CAL27 são:

Modelo in vitro

As células CAL27 servem como modelo in vitro do carcinoma de células escamosas oral. No entanto, é importante notar que podem não refletir com precisão as características e a complexidade dos tumores de células escamosas originais.

 

Aplicações das células CAL27 na investigação

A linha celular CAL27 tem uma vasta gama de aplicações na investigação biomédica. Algumas das principais utilizações na investigação estão aqui listadas.

• Biologia do cancro: As células CAL27 têm sido amplamente utilizadas para explorar os mecanismos moleculares e celulares subjacentes ao desenvolvimento e progressão do carcinoma de células escamosas oral (OSCC). Os investigadores também estudam mutações genéticas, vias de sinalização e biomarcadores importantes relacionados com tumores de células escamosas. Um estudo realizado em 2021 utilizou células CAL27 e investigou o papel do CD147 no desenvolvimento do cancro de células escamosas oral. Os resultados do estudo mostraram que a supressão do CD147 causou a inibição da proliferação, migração e invasão das células CAL27. Além disso, a sua regulação negativa também impede o desenvolvimento de resistência aos medicamentos nas células cancerígenas [2].
• Desenvolvimento de medicamentos: A linha celular CAL27 serve como uma ferramenta valiosa para o rastreio e teste de medicamentos antitumorais. Os investigadores utilizam estas células para testar a eficácia de vários agentes quimioterapêuticos, terapias direcionadas e medicamentos experimentais na inibição da proliferação, crescimento e viabilidade das células cancerígenas orais. Além disso, o efeito modulador dos potenciais agentes anticancerígenos também foi avaliado nas vias de sinalização desreguladas das células cancerígenas. Isto pode ajudar no desenvolvimento de tratamentos eficazes e personalizados para combater a doença. Um estudo explorou o potencial antitumoral das nanopartículas de óxido de zinco utilizando células CAL27. Os resultados do estudo revelaram que as nanopartículas de óxido de zinco produziram efeitos citotóxicos e também induziram a mitofagia mediada pela via PINK1/Parkin nas células cancerígenas da língua CAL27 [3]. De forma semelhante, os investigadores observaram o potencial anticancerígeno da doxorrubicina e da sua forma nanoformulada (Doxil) no cancro de células escamosas orais CAL27 [4].

5. Publicações sobre a linha celular CAL27

Esta secção do artigo abordará algumas publicações interessantes e mais citadas sobre as células cancerígenas CAL27:

Inibição das células do carcinoma espinocelular oral CAL27 através do alvo na via Hedgehog com vismodegib ou itraconazol

Esta investigação foi publicada na revista Frontiers in Oncology (2020). O estudo explorou os efeitos anticancerígenos do vismodegib ou do itraconazol no cancro de células escamosas orais, utilizando células CAL27.  

A PLAU promove a proliferação celular e a transição epitelial-mesenquimal no carcinoma de células escamosas da cabeça e pescoço

Este artigo publicado na revista Frontiers in Genetics (2021) propôs que a proteína ativadora do plasminogênio, a uroquinase (PLAU), estimula a proliferação, a migração e a transição epitelial-mesenquimal (EMT) das células CAL27.

O microRNA-145-5p agrava a apoptose celular e o stress oxidativo no carcinoma de células escamosas da língua

Este artigo publicado na revista Experimental and Therapeutic Medicine (2021) constatou que o miRNA-145-5p agrava o stress oxidativo e a morte das células CAL27 e suprime a via de sinalização PI3K/AKT.

Atividade antitumoral do extrato vegetal morina em células de carcinoma de células escamosas da língua

Este estudo publicado na revista Oncology Reports (2018) explorou a atividade anticancerígena de um bioflavonóide chamado morina, utilizando células CAL27.

Redução de patógenos orais e danos oxidativos na linha celular CAL 27 por extratos de Rosmarinus officinalis L. e Taraxacum officinale

Este artigo publicado no Journal of Ethnopharmacology (2023) investigou o potencial terapêutico dos extratos de Rosmarinus officinalis L. e Taraxacum officinale em células CAL27.

Recursos para a linha celular CAL27: protocolos, vídeos e mais

Existem recursos limitados disponíveis sobre a linha celular CAL27. Nesta secção, listámos alguns protocolos gerais que também podem ajudá-lo a lidar com as células CAL27:

• Transfecção de células CAL27: Este vídeo irá ajudá-lo a aprender um protocolo geral para a transfecção de ADN plasmídeo.
• Subcultivo de células aderentes: Este vídeo irá orientá-lo de forma abrangente sobre o subcultivo de linhas celulares aderentes.

A ligação seguinte contém o protocolo de cultura celular CAL27.

• Linha celular CAL27: Este site contém informações sobre meios de cultura para CAL27, densidade de sementeira, tempo de duplicação, etc. Além disso, contém um protocolo para subcultura e manuseamento de culturas proliferativas e criopreservadas.

Referências

1. Liu, X., et al., LINC00472 suprime o crescimento do carcinoma de células escamosas oral ao atuar sobre o eixo miR-455-3p/ELF3. Bioengineered, 2022. 13(1): p. 1162-1173.
2. Pan, S., et al., A inativação do CD147 inibe a proliferação, invasão e resistência aos medicamentos das células CAL27 do cancro oral humano in vitro e in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: p. 378-389.
3. Wang, J., et al., As nanopartículas de óxido de zinco induzem toxicidade nas linhas celulares de cancro oral CAL 27 através da ativação da mitofagia mediada por PINK1/Parkin. International Journal of Nanomedicine, 2018: p. 3441-3450.
4. Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen e A.M.S. Eldeen, A nano-doxorrubicina revestida com lipossomas induz a apoptose em células CAL-27 de carcinoma de células escamosas orais. Archives of Oral Biology, 2019. 103: p. 47-54.