Pāriet uz saturu
CHO-CD36
Audums
Olnīcas
Slimība
Ķīniešu kāmja olnīca, bez audzēja; ģenētiski modificēta, lai nodrošinātu CD36 ekspresiju uz virsmas

Dokumenti

CHO-CD36

Cell line · Preces numurs 305979

Atbrīvojums no atbildības: Norādītās šūnu līniju cenas attiecas vienīgi uz akadēmiskajiem/bezpeļņas klientiem. Komerciālajām organizācijām cenas...

€1,900.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Pēc pasūtījuma
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Atbrīvojums no atbildības: Norādītās šūnu līniju cenas attiecas tikai uz akadēmiskajiem/bezpeļņas klientiem. Komerciālām organizācijām cena ir aptuveni 6250 eiro.
Ja Jūs pārstāvat komerciālu organizāciju vai neesat pārliecināts, kura kategorija Jums attiecas, lūdzu, sazinieties ar mums.


CHO-CD36 šūnas ir rekombinantas Ķīnas kāmja olnīcu (CHO) šūnas, kas inženierijas ceļā modificētas, lai stabili ekspresētu cilvēka CD36 — daudzfunkcionālu B klases skavengera receptoru, kas pazīstams arī kā trombocītu glikoproteīns IV (GPIV) vai taukskābju translokāze (FAT). CD36 ir plaši iesaistīts lipīdu uzsūkšanā, taukskābju metabolismā, angiogēnēzē, iekaisumā, iedzimtajā imunitātē un šūnu adhezijā. Receptors mijiedarbojas ar plašu ligandu klāstu, tostarp oksidētiem zema blīvuma lipoproteīniem (oxLDL), garo ķēžu taukskābēm, trombospondīnu-1, fosfolipīdiem un apoptozes šūnām. CD36 ekspresijas regulācijas traucējumi ir saistīti ar vielmaiņas traucējumiem, aterosklerozi, hronisku iekaisumu un audzēju progresēšanu, padarot rekombinantos CD36 ekspresējošos šūnu modeļus par vērtīgiem instrumentiem mehānisma un terapeitiskajos pētījumos.

CHO-CD36 šūnas plaši izmanto, lai pētītu receptoru un ligandu mijiedarbību, lipīdu transporta mehānismus un CD36 saistīto ceļu terapeitisko mērķēšanu. Šīs šūnas atbalsta kvantitatīvo analīzi par ligandu saistīšanos, receptoru internalizāciju, taukskābju uzsūkšanos un pakārtotajiem signālu pārraides notikumiem, kas saistīti ar oksidatīvo stresu, imūnmodulāciju un metabolisko adaptāciju. Onkoloģijas pētījumos CHO-CD36 modeļi ir noderīgi, lai izpētītu CD36 lomu metastāzēs, audzēja lipīdu vielmaiņā un rezistencē pret metabolisko stresu. Šīs šūnas tiek izmantotas arī monoklonālo antivielu, mazmolekulāro inhibitoru, uz lipīdiem vērstu terapeitisko līdzekļu un pret CD36 vērstu attēlveidošanas līdzekļu izstrādē un raksturošanā. Plūsmas citometrijas testos, uzsūkšanās testos un augstas caurlaidspējas skrīninga platformās parasti izmanto CHO-CD36 šūnas to stabilās un kontrolētās rekombinantā receptora ekspresijas dēļ.

Audums
Olnīcas
Slimība
Ķīniešu kāmja olnīca, bez audzēja; ģenētiski modificēta, lai nodrošinātu CD36 ekspresiju uz virsmas
Pieteikumi
Antivielu skrīnings; CD36 mērķterapijas izstrāde; lipīdu vielmaiņas pētījumi; skavengera receptoru bioloģija; plūsmas citometrija

02Klasifikācija

Organisms
Ķīniešu kāmītis
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This CHO cell line contains a CD36 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Olnīcas epitēlija šūna
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
aptuveni 14–16 stundas

04Identifikatori

Atsauce
CHO-CD36 (Cytion kataloga numurs 305979)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10029
Cellosaurus
CVCL_8848

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
CD36

06Apstrāde un audzēšana

Barotne

Pielipušām kultūrām: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)

Suspensijas kultūrām: CHO augšanas barotne A (no InSCREENeX; InSCREENeX kataloga numurs INS-ME-1039)

Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Pielipušām kultūrām: Pievienojiet barotni ar 5% FBS. Pievienojiet ģenētiķīnu (G418-Sulfat), lai sasniegtu 0,5 mg/ml galīgo koncentrāciju.
Disociācijas reaģents
Pielipušām kultūrām: Tripsīns-EDTA
Pārstādīšana
Parastai adherentu šūnu kultūrai: Lai noņemtu atlikušo barotni, aspirējiet veco barotni no pielipušajām šūnām un izskalojiet tās ar PBS, lai noņemtu atlikušo barotni. Pēc PBS atsūknēšanas pievienojiet atbilstošu tripsīna/EDTA šķīduma tilpumu, ņemot vērā kultūras trauka lielumu (piemēram, 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai), un inkubējiet istabas temperatūrā vai 37 °C 5 līdz 10 minūtes, vai līdz šūnas atdalās. Novērot atdalīšanos ar mikroskopu un, ja nepieciešams, viegli piesitiet trauku, lai atbrīvotu šūnas. Pēc atdalīšanās pievienot pilnu barotni, lai inaktivētu tripsīnu/EDTA, uzmanīgi resuspendēt šūnas un šūnu suspensijas alikvotu pārvietot jaunā barotnē ar svaigu barotni. Ievietot trauku inkubatorā, kas iestatīts 37 °C temperatūrā ar 5 %CO2, un ik pēc 2-3 dienām mainīt barotni.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 5
Sēšanas blīvums
2 līdz 5 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa

Pēc atkausēšanas sadaliet šūnas T25 kolbās proporcijā 1:2 līdz 1:3 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un salipt (adhēzijas kultūrām) vismaz 24 stundas.

Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Pieaugušo