Pāriet uz saturu
B95-8
Audums
Asinis
Sinonīmi
B95.8, B 95.8, B 95-8, B-95-8, B958, GM07404, GM07404A, GM07404D

Dokumenti

B95-8

Cell line · Preces numurs 601102

The B95-8 cell line is an immortalized marmoset B lymphoblastoid line, derived from the peripheral blood leukocytes of a cotton-top marmoset (Saguinus oed...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

B95-8 šūnu līnija ir amortizēta marmozetes B limfoblastoīdu līnija, kas iegūta no kokvilnas marmozetes (Saguinus oedipus) perifēro asiņu leikocītiem. Šī šūnu līnija tika izveidota, inficējoties ar Epšteina-Barra vīrusu (EBV), kas ir izplatīta B šūnu imortalizācijas metode. EBV klātbūtne ir galvenais faktors, lai B95-8 līniju varētu izmantot pētniecībā, jo īpaši pētījumos, kas saistīti ar vīrusu onkoloģiju, vīrusa un saimnieka mijiedarbību un paša EBV bioloģiju.

B95-8 šūnas bieži izmanto kā Epšteina-Barra vīrusa avotu virusoloģijas pētījumos. Tās ražo infekciozas vīrusa daļiņas, padarot tās par nenovērtējamu instrumentu EBV pavairošanai un eksperimentiem, kuros nepieciešams aktīvs vīruss. Turklāt šī šūnu līnija ir palīdzējusi izstrādāt vakcīnas un terapeitiskās stratēģijas pret EBV saistītām slimībām, tostarp Burkita limfomu un Hodžkina limfomu. Šūnas ir nozīmīgas arī pētījumos par imūnsistēmas reakciju uz EBV, jo tās var izmantot, lai modelētu B šūnu transformāciju un izprastu EBV izraisītas audzēju veidošanās mehānismus.

Audums
Asinis
Sinonīmi
  • B95.8
  • B 95.8
  • B 95-8
  • B-95-8
  • B958
  • GM07404
  • GM07404A
  • GM07404D

02Klasifikācija

Organisms
Kokvilnas galvas tamarīns
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Limfoblasts

04Identifikatori

Atsauce
B95-8 (Cytion kataloga numurs 601102)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9490
Cellosaurus
CVCL_1953

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Pārstādīšana
Viegli homogenizējiet šūnu suspensiju kolbā, pipetējot uz augšu un uz leju, pēc tam ņemiet reprezentatīvu paraugu, lai noteiktu šūnu blīvumu uz ml. Atšķaidiet suspensiju, lai sasniegtu šūnu koncentrāciju 1 x 105 šūnas/ml ar svaigu kultūras barotni, un sadaliet pielāgoto suspensiju jaunās kolbās turpmākai kultivēšanai.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.