Ga naar de inhoud
U2932
Weefsel
Ascites
Ziekte
Diffuus groot B-cel lymfoom geactiveerd B-celtype
Synoniemen
U2932

Documenten

U2932

Cell line · Productnummer 305482

The U-2932 cell line is a diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) model that was established from a patient who developed secondary DLBCL following treatmen...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De U-2932-cellijn is een model voor diffuus grootcellig B-cellymfoom (DLBCL) dat is opgezet op basis van een patiënt bij wie secundair DLBCL ontstond na behandeling voor Hodgkin-lymfoom (HL). De cellijn vertoont morfologische kenmerken die typisch zijn voor DLBCL en het is aangetoond dat deze kolonies vormt in naakte muizen, wat het tumorogene potentieel ervan bevestigt. U-2932 is afkomstig uit ascitesvocht en behoudt een B-celfenotype met een somatisch hypergemuteerde herschikking van het immunoglobuline-zware-keten (IgH)-gen. Opvallend is dat de cellijn Epstein-Barr-virus (EBV)-negatief is, waardoor deze zich onderscheidt van sommige andere van lymfomen afgeleide cellijnen.

Genomische karakterisering van U-2932 onthult een complex karyotype, met onder meer sterke amplificaties op de chromosomale banden 18q21 en 3q27, regio’s die geassocieerd worden met oncogene drijfveren zoals BCL-2 en BCL-6, die beide in deze cellijn tot overexpressie komen. Bovendien draagt de cellijn een mutatie in het tumorsuppressorgen p53 op aminozuurpositie 176, waarbij immunohistochemische analyse de overexpressie van p53 bevestigt. Deze genetische veranderingen duiden op een rol bij zowel de tumorprogressie als de mogelijke resistentie tegen chemotherapie.

Weefsel
Ascites
Ziekte
Diffuus groot B-cel lymfoom geactiveerd B-celtype
Synoniemen
  • U2932

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Kleine ronde cellen die afzonderlijk en in groepjes in suspensie groeien
Celtype
B-cellymfoom
Verdubbelingstijd
48 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
U2932 (Cytion-catalogusnummer 305482)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1896

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
CD3-, CD10+, CD13-, CD19+, CD20+, CD37+, CD38+, cyCD79a+, CD80+, CD138+, HLA-DR+, sIgG-, cIgG-, sIgM+, cIgM+, sIgkappa+, cIgkappa+, sIglambda-, cIglambda-

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% hitte-geïnactiveerde FBS
Zaaidichtheid
3-5 × 10⁵/ml
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
29 jaar
Etnische afkomst
Ongespecificeerd