U2932

A linhagem celular U-2932 é um modelo de linfoma difuso de grandes células B (DLBCL) que foi estabelecida a partir de um paciente que desenvolveu DLBCL secundário após o tratamento para o linfoma de Hodgkin (LH). A linhagem celular apresenta características morfológicas típicas do DLBCL e demonstrou formar colônias em camundongos nude, confirmando seu potencial tumorigênico. A U-2932 é derivada de líquido ascítico e mantém um fenótipo de células B com um rearranjo do gene da cadeia pesada de imunoglobulina (IgH) somaticamente hipermutado. Notavelmente, a linhagem celular é negativa para o vírus de Epstein-Barr (EBV), o que a distingue de algumas outras linhagens celulares derivadas de linfomas.

A caracterização genômica da U-2932 revela um cariótipo complexo, incluindo amplificações de alto nível nas faixas cromossômicas 18q21 e 3q27, regiões associadas a fatores oncogênicos como BCL-2 e BCL-6, ambos superexpressos nessa linha celular. Além disso, a linhagem celular apresenta uma mutação no gene supressor de tumor p53 na posição 176 do aminoácido, com a análise imuno-histoquímica confirmando a superexpressão de p53. Essas alterações genéticas sugerem um papel tanto na progressão tumoral quanto na potencial resistência à quimioterapia.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.