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U2932
Gewebe
Aszites
Krankheit
Diffuses großzelliges B-Zell-Lymphom aktivierter B-Zell-Typ
Synonyme
U2932

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U2932

Cell line · Artikelnummer 305482

The U-2932 cell line is a diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) model that was established from a patient who developed secondary DLBCL following treatmen...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie U-2932 ist ein Modell für das diffuse großzellige B-Zell-Lymphom (DLBCL), das aus einem Patienten gewonnen wurde, bei dem nach der Behandlung eines Hodgkin-Lymphoms (HL) ein sekundäres DLBCL auftrat. Die Zelllinie weist für das DLBCL typische morphologische Merkmale auf und bildet nachweislich Kolonien in Nacktmäusen, was ihr tumorogenes Potenzial bestätigt. U-2932 stammt aus Aszitesflüssigkeit und weist einen B-Zell-Phänotyp mit einer somatisch hypermutierten Neuanordnung des Immunglobulin-Schwerketten-Gens (IgH) auf. Bemerkenswert ist, dass die Zelllinie Epstein-Barr-Virus (EBV)-negativ ist, was sie von einigen anderen aus Lymphomen stammenden Zelllinien unterscheidet.

Die genomische Charakterisierung von U-2932 zeigt einen komplexen Karyotyp, einschließlich starker Amplifikationen an den Chromosomenbändern 18q21 und 3q27 – Regionen, die mit onkogenen Treibern wie BCL-2 und BCL-6 assoziiert sind, die beide in dieser Zelllinie überexprimiert werden. Zudem weist die Zelllinie eine Mutation im Tumorsuppressorgen p53 an der Aminosäureposition 176 auf, wobei eine immunhistochemische Analyse die p53-Überexpression bestätigt. Diese genetischen Veränderungen deuten auf eine Rolle sowohl bei der Tumorprogression als auch bei einer potenziellen Resistenz gegenüber einer Chemotherapie hin.

Gewebe
Aszites
Krankheit
Diffuses großzelliges B-Zell-Lymphom aktivierter B-Zell-Typ
Synonyme
  • U2932

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Kleine, runde Zellen, die einzeln und in Gruppen in Suspension wachsen
Zelltyp
B-Zell-Lymphom
Verdopplungszeit
48 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
U2932 (Cytion-Katalognummer 305482)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1896

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
CD3-, CD10+, CD13-, CD19+, CD20+, CD37+, CD38+, cyCD79a+, CD80+, CD138+, HLA-DR+, sIgG-, cIgG-, sIgM+, cIgM+, sIgkappa+, cIgkappa+, sIglambda-, cIglambda-

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% hitzeinaktiviertem FBS
Aussaatdichte
3–5 × 10⁵/ml
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
29 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Nicht spezifiziert