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CBRH7919
Tecido
Fígado
Doença
Carcinoma hepatocelular
Sinónimos
CBRH-7919

Documentos

CBRH7919

Cell line · Número do produto 305479

A linha celular CBRH7919 é um modelo de hepatoma de rato frequentemente utilizado na investigação do cancro para estudar os mecanismos do cancro do fígado e as intervenções terapêuticas...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular CBRH7919 é um modelo de hepatoma de rato frequentemente utilizado na investigação oncológica para estudar os mecanismos do cancro do fígado e as intervenções terapêuticas. Derivadas do carcinoma hepatocelular em ratos, estas células caracterizam-se pela sua rápida proliferação e constituem um modelo útil para o estudo da hepatocarcinogénese e das funções metabólicas específicas do fígado. Estudos recentes têm destacado o envolvimento da linha celular CBRH7919 na avaliação dos efeitos de vários compostos bioativos no crescimento das células tumorais e nas vias de sinalização.

Uma área significativa de investigação envolvendo as células CBRH7919 inclui a exploração de como os compostos naturais afetam a proliferação celular e a apoptose. Por exemplo, demonstrou-se que os plasmalogénios de colina (ChoPlas), extraídos do fígado de suíno, inibem a proliferação das células CBRH7919. Do ponto de vista mecanístico, verificou-se que o tratamento com ChoPlas aumenta a expressão de caveolina-1, ao mesmo tempo que reduz os níveis de fosfo-Akt (pAkt) e de Bcl-2, influenciando assim a via de sinalização PI3K/Akt. Esta modulação conduz à paragem do ciclo celular na transição G1/S, acompanhada por uma diminuição das cinases dependentes de ciclina (CDK2, CDK4) e das ciclinas E e D, que são reguladores cruciais da progressão do ciclo celular.

Estudos adicionais associaram a expressão de proteínas específicas, como a fudenina, à regulação metabólica nas células CBRH7919. A fudenina, um homólogo truncado da promina do rato, é relatada como sendo regulada positivamente em condições de elevada glicose e pode aumentar a expressão de GAPDH nas células CBRH7919. Isto sugere que a fudenina poderá desempenhar um papel no metabolismo da glicose e influenciar potencialmente a dinâmica energética celular e as respostas ao stress, tornando as células CBRH7919 um modelo valioso para a investigação sobre a diabetes e o cancro relacionado com o metabolismo.

Tecido
Fígado
Doença
Carcinoma hepatocelular
Sinónimos
  • CBRH-7919

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Não especificado
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Identificadores

Referência
CBRH7919 (número de catálogo da Cytion 305479)
Número de identificação fiscal do NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_7176

04Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 20% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
2-4*10⁴/cm²
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

06Doador

Raça / subespécie
Wistar
Idade do dador
Não especificado