MC3T3-E1 Subclone 14

Les cellules du sous-clone 14 de la lignée MC3T3-E1 constituent une ressource précieuse en sciences biologiques, notamment dans l’étude des ostéoblastes. Issu du crâne d’une souris C57BL/6, ce sous-clone a été soigneusement sélectionné en fonction de sa forte activité de phosphatase alcaline (ALP) au repos.

Cette caractéristique unique en fait un modèle idéal pour étudier la différenciation des ostéoblastes et la formation de tissu osseux calcifié in vitro. En tant que type cellulaire préostéoblastique, les cellules MC3T3-E1 sous-clone 14 présentent une morphologie fibroblastique et sont principalement associées au tissu osseux provenant du crâne.

L’une des caractéristiques notables des cellules MC3T3-E1 sous-clone 14 est leur capacité à se différencier en ostéoblastes et en ostéocytes. Grâce à leur grande ressemblance morphologique et fonctionnelle avec les ostéoblastes primaires du crâne, ces cellules constituent une plateforme fiable pour l’étude de la signalisation de la matrice extracellulaire (MEC) et des mécanismes associés à la différenciation ostéoblastique.

Lorsqu’elles sont cultivées avec de l’acide ascorbique et du phosphate inorganique à des concentrations optimales (3 à 4 mM), les cellules du sous-clone 14 de la lignée MC3T3-E1 présentent des niveaux remarquables de différenciation en ostéoblastes. Après seulement dix jours, elles forment une MEC bien minéralisée, offrant ainsi aux chercheurs un aperçu du processus complexe de formation du tissu osseux.

De plus, on a constaté que ces cellules sécrètent du collagène, un composant essentiel du tissu osseux, et expriment le facteur inhibiteur de la leucémie murine (MIF) dans l’ARN. Ces caractéristiques renforcent encore leur pertinence dans l’étude de divers processus biologiques liés au développement et à l’homéostasie osseuse. La lignée cellulaire MC3T3-E1 sous-clone 14 a également été utilisée dans des recherches de pointe.

Par exemple, elle a servi à proposer un cadre d’analyse du cytosquelette à filaments d’actine, offrant ainsi un aperçu de l’architecture intracellulaire complexe des ostéoblastes. De plus, des chercheurs ont exploré les effets du magnésium biodégradable et des alliages de magnésium sur ces cellules, en étudiant leurs interactions avec différents matériaux et leur impact sur certaines propriétés cellulaires.

Grâce à leurs applications variées, ces cellules sont d’une valeur inestimable dans les études de culture cellulaire en 3D, fournissant un modèle in vitro réaliste pour étudier le comportement et la différenciation des ostéoblastes dans un environnement tridimensionnel. Leur pertinence s’étend à divers domaines de recherche, notamment l’ingénierie tissulaire, la régénération osseuse et le développement d’interventions thérapeutiques pour les troubles liés aux os.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.