MC3T3-E1 Subclone 14

MC3T3-E1 Subclone 14-celler er en verdifull ressurs i biologisk forskning, spesielt når det gjelder studier av osteoblaster. Disse cellene stammer fra C57BL/6 musekalvarier, og de ble nøye utvalgt på grunn av sin høye alkaliske fosfataseaktivitet (ALP) i hvile.

Denne unike egenskapen gjør dem til en ideell modell for å undersøke osteoblastdifferensiering og dannelsen av forkalket beinvev in vitro. MC3T3-E1 Subclone 14 er en preosteoblast-celletype med fibroblastmorfologi, og de er primært assosiert med benvev som stammer fra kalvariene.

Et av de viktigste kjennetegnene ved MC3T3-E1 Subclone 14-celler er deres evne til å differensiere til osteoblaster og osteocytter. Disse cellene har store morfologiske og funksjonelle likheter med primære osteoblaster fra kalvariene, og de er derfor en pålitelig plattform for å studere signalering fra ekstracellulær matriks (ECM) og atferd i forbindelse med osteoblastdifferensiering.

Når MC3T3-E1 Subclone 14-celler dyrkes med askorbinsyre og uorganisk fosfat i optimale konsentrasjoner (3 til 4 mM), utviser de en bemerkelsesverdig grad av osteoblastdifferensiering. Etter bare ti dager danner de et godt mineralisert ECM, noe som gir forskerne et innblikk i den kompliserte prosessen med dannelse av beinvev.

Det har dessuten vist seg at disse cellene skiller ut kollagen, en essensiell komponent i beinvev, og uttrykker murin leukemihemmende faktor (MIF) i RNA. Disse egenskapene bidrar ytterligere til at de er relevante for å undersøke ulike biologiske prosesser knyttet til beinutvikling og homeostase. MC3T3-E1 Subclone 14-cellelinjen har også blitt brukt i banebrytende forskning.

Den har for eksempel blitt brukt til å foreslå et rammeverk for analyse av aktinfilament-cytoskjelettet, noe som gir innsikt i den komplekse intracellulære arkitekturen i osteoblaster. I tillegg har forskere utforsket effekten av biologisk nedbrytbart magnesium og magnesiumlegeringer på disse cellene, og studert deres interaksjon med ulike materialer og deres innvirkning på utvalgte cellulære egenskaper.

Disse cellene har mange bruksområder, og de er uvurderlige i 3D-cellekulturstudier, der de utgjør en realistisk in vitro-modell for å undersøke osteoblasters oppførsel og differensiering i et tredimensjonalt miljø. De er relevante for en rekke forskningsfelt, blant annet vevsteknikk, benregenerering og utvikling av terapeutiske intervensjoner for benrelaterte lidelser.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring