Prejsť na obsah
MC3T3-E1 Subclone 14
Tkanivo
Kosť, kalvária
Synonymá
MC3T3-E1 SUBCLONE 14

Dokumenty

MC3T3-E1 Subclone 14

Cell line · Číslo výrobku 305185

MC3T3-E1 Subclone 14 cells are a valuable resource in biological science, specifically in the study of osteoblasts. Derived from a C57BL/6 mouse calvaria,...

€650.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky MC3T3-E1 Subclone 14 sú cenným zdrojom v biologickej vede, konkrétne pri štúdiu osteoblastov. Tieto bunky odvodené z kalvárie myší C57BL/6 boli starostlivo vybrané na základe ich vysokej aktivity alkalickej fosfatázy (ALP) v pokoji.

Táto jedinečná vlastnosť z nich robí ideálny model na skúmanie diferenciácie osteoblastov a tvorby kalcifikovaného kostného tkaniva in vitro. Bunky MC3T3-E1 Subclone 14 ako preosteoblastový typ buniek vykazujú morfológiu fibroblastov a sú primárne spojené s kostným tkanivom odvodeným z kalvárie.

Jednou z pozoruhodných vlastností buniek MC3T3-E1 Subclone 14 je ich schopnosť diferencovať sa na osteoblasty a osteocyty. Vďaka svojej rozsiahlej morfologickej a funkčnej podobnosti s primárnymi kalváriovými osteoblastami ponúkajú tieto bunky spoľahlivú platformu na štúdium signalizácie extracelulárnej matrix (ECM) a správania spojeného s diferenciáciou osteoblastov.

Pri kultivácii s kyselinou askorbovou a anorganickým fosfátom v optimálnych koncentráciách (3 až 4 mM) vykazujú bunky MC3T3-E1 Subclone 14 pozoruhodnú úroveň diferenciácie osteoblastov. Už po desiatich dňoch vytvárajú dobre mineralizovanú ECM, čo výskumníkom poskytuje pohľad do zložitého procesu tvorby kostného tkaniva.

Okrem toho sa zistilo, že tieto bunky vylučujú kolagén, základnú zložku kostného tkaniva, a exprimujú inhibičný faktor myšej leukémie (MIF) v RNA. Tieto vlastnosti ďalej prispievajú k ich významu pri skúmaní rôznych biologických procesov súvisiacich s vývojom a homeostázou kostí. Bunková línia MC3T3-E1 Subclone 14 sa tiež využíva v špičkovom výskume.

Bola napríklad využitá na návrh rámca analýzy cytoskeletu aktínových vlákien, ktorý ponúka pohľad na komplexnú vnútrobunkovú architektúru osteoblastov. Okrem toho výskumníci skúmali účinky biodegradovateľného horčíka a horčíkových zliatin na tieto bunky, pričom študovali ich interakcie s rôznymi materiálmi a ich vplyv na vybrané bunkové vlastnosti.

Vďaka ich rôznorodému použitiu sú tieto bunky neoceniteľné v štúdiách 3D bunkových kultúr, ktoré poskytujú realistický in vitro model na skúmanie správania a diferenciácie osteoblastov v trojrozmernom prostredí. Ich význam sa rozširuje na rôzne oblasti výskumu vrátane tkanivového inžinierstva, regenerácie kostí a vývoja terapeutických zásahov pri poruchách súvisiacich s kosťami.

Tkanivo
Kosť, kalvária
Aplikácie
3D bunkové kultúry, diferenciačné štúdie
Synonymá
  • MC3T3-E1 SUBCLONE 14

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Nešpecifikované
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblasty
Tumorigenický
Áno

04Identifikátory

Citácia
Subklon 14 MC3T3-E1 (katalógové číslo Cytion 305185)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5437

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
Kolagén

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Alfa MEM, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: Ribonukleozidy, w: Deoxyribonukleozidy, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/L NaHCO3, w/o: Kyselina askorbová (GIBCO, katalógové číslo A1049001. Tento výrobok nedodávame; zvážte prosím iných dodávateľov. Ak potrebujete ďalšiu pomoc, dajte nám prosím vedieť.)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
C57BL/6
Vek darcu
Novorodenec