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MC3T3-E1 Subclone 14
Tessuto
Osso, calvario
Sinonimi
MC3T3-E1 SUBCLONE 14

Documenti

MC3T3-E1 Subclone 14

Cell line · Codice prodotto 305185

MC3T3-E1 Subclone 14 cells are a valuable resource in biological science, specifically in the study of osteoblasts. Derived from a C57BL/6 mouse calvaria,...

€650.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule MC3T3-E1 Subclone 14 sono una risorsa preziosa per la scienza biologica, in particolare per lo studio degli osteoblasti. Derivate da una calvaria di topo C57BL/6, queste cellule sono state accuratamente selezionate in base alla loro elevata attività di fosfatasi alcalina (ALP) a riposo.

Questa caratteristica unica le rende un modello ideale per studiare il differenziamento degli osteoblasti e la formazione di tessuto osseo calcificato in vitro. Come tipo di cellula preosteoblastica, le cellule MC3T3-E1 Subclone 14 presentano una morfologia da fibroblasti e sono principalmente associate al tessuto osseo derivato dalla calvaria.

Una delle caratteristiche notevoli delle cellule MC3T3-E1 Subclone 14 è la loro capacità di differenziarsi in osteoblasti e osteociti. Grazie all'ampia somiglianza morfologica e funzionale con gli osteoblasti calvariali primari, queste cellule offrono una piattaforma affidabile per studiare la segnalazione della matrice extracellulare (ECM) e il comportamento associato al differenziamento degli osteoblasti.

Se coltivate con acido ascorbico e fosfato inorganico a concentrazioni ottimali (da 3 a 4 mM), le cellule MC3T3-E1 Subclone 14 mostrano livelli notevoli di differenziazione osteoblastica. Dopo soli dieci giorni, formano una ECM ben mineralizzata, fornendo ai ricercatori una finestra sull'intricato processo di formazione del tessuto osseo.

Inoltre, si è scoperto che queste cellule secernono collagene, un componente essenziale del tessuto osseo, ed esprimono il fattore inibitorio della leucemia murina (MIF) in RNA. Queste caratteristiche contribuiscono ulteriormente alla loro importanza nello studio di vari processi biologici legati allo sviluppo e all'omeostasi ossea. La linea cellulare MC3T3-E1 Subclone 14 è stata impiegata anche in ricerche all'avanguardia.

Ad esempio, è stata utilizzata per proporre un framework di analisi del citoscheletro del filamento di actina, offrendo approfondimenti sulla complessa architettura intracellulare degli osteoblasti. Inoltre, i ricercatori hanno esplorato gli effetti del magnesio biodegradabile e delle leghe di magnesio su queste cellule, studiando le loro interazioni con diversi materiali e il loro impatto su determinate proprietà cellulari.

Grazie alle loro diverse applicazioni, queste cellule sono preziose negli studi sulle colture cellulari 3D, in quanto forniscono un modello realistico in vitro per studiare il comportamento e la differenziazione degli osteoblasti in un ambiente tridimensionale. La loro importanza si estende a diversi campi di ricerca, tra cui l'ingegneria dei tessuti, la rigenerazione ossea e lo sviluppo di interventi terapeutici per i disturbi legati alle ossa.

Tessuto
Osso, calvario
Applicazioni
coltura cellulare 3D, studi di differenziazione
Sinonimi
  • MC3T3-E1 SUBCLONE 14

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Non specificato
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Fibroblasti
Tumorigenico
Sì

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MC3T3-E1 Sottoclone 14 (catalogo Cytion numero 305185)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5437

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Collagene

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
Alpha MEM, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: ribonucleosidi, w: desossiribonucleosidi, w: 1,0 mM di piruvato di sodio, w: 2,2 g/L di NaHCO3, w/o: Acido ascorbico (GIBCO, n. di catalogo A1049001. Non forniamo questo prodotto; si prega di prendere in considerazione altri fornitori. Se avete bisogno di ulteriore assistenza, fatecelo sapere)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
C57BL/6
Età dei donatori
Neonato