MC3T3-E1 Subclone 14

As células MC3T3-E1 Subclone 14 são um recurso valioso nas ciências biológicas, especificamente no estudo dos osteoblastos. Derivadas da calvária de um rato C57BL/6, estas células foram cuidadosamente selecionadas com base na sua elevada atividade de fosfatase alcalina (ALP) em repouso.

Esta caraterística única torna-as um modelo ideal para investigar a diferenciação dos osteoblastos e a formação de tecido ósseo calcificado in vitro. Como um tipo de célula pré-osteoblástica, as células MC3T3-E1 Subclone 14 exibem uma morfologia fibroblástica e estão principalmente associadas ao tecido ósseo derivado da calvária.

Uma das caraterísticas notáveis das células MC3T3-E1 Subclone 14 é a sua capacidade de se diferenciarem em osteoblastos e osteócitos. Devido à sua grande semelhança morfológica e funcional com os osteoblastos primários da calvária, estas células oferecem uma plataforma fiável para o estudo da sinalização da matriz extracelular (ECM) e do comportamento associado à diferenciação dos osteoblastos.

Quando cultivadas com ácido ascórbico e fosfato inorgânico em concentrações óptimas (3 a 4 mM), as células MC3T3-E1 Subclone 14 exibem níveis notáveis de diferenciação osteoblástica. Após apenas dez dias, formam uma ECM bem mineralizada, fornecendo aos investigadores uma janela para o intrincado processo de formação de tecido ósseo.

Além disso, verificou-se que estas células segregam colagénio, um componente essencial do tecido ósseo, e expressam o fator inibidor da leucemia murina (MIF) no ARN. Estas caraterísticas contribuem ainda mais para a sua relevância na investigação de vários processos biológicos relacionados com o desenvolvimento e a homeostasia óssea. A linha celular MC3T3-E1 Subclone 14 também tem sido utilizada em investigação de ponta.

Por exemplo, foi utilizada para propor uma estrutura de análise do citoesqueleto do filamento de actina, oferecendo uma perspetiva da complexa arquitetura intracelular dos osteoblastos. Além disso, os investigadores exploraram os efeitos do magnésio biodegradável e das ligas de magnésio nestas células, estudando as suas interações com diferentes materiais e o seu impacto em propriedades celulares selecionadas.

Com as suas diversas aplicações, estas células têm um valor inestimável em estudos de cultura de células 3D, proporcionando um modelo in vitro realista para investigar o comportamento e a diferenciação dos osteoblastos num ambiente tridimensional. A sua relevância estende-se a vários domínios de investigação, incluindo a engenharia de tecidos, a regeneração óssea e o desenvolvimento de intervenções terapêuticas para doenças relacionadas com os ossos.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia