MC3T3-E1 Subclone 14

MC3T3-E1 subkloon 14 rakud on väärtuslik ressurss bioloogilises teaduses, eriti osteoblastide uurimisel. Need rakud on saadud C57BL/6 hiire kalvariast, mis valiti hoolikalt välja nende kõrge leeliselise fosfataasi (ALP) aktiivsuse alusel puhkeolekus.

See ainulaadne omadus muudab nad ideaalseks mudeliks osteoblastide diferentseerumise ja lubjastunud luukoe moodustumise uurimiseks in vitro. Preosteoblastide rakutüübina on MC3T3-E1 subkloon 14 rakud fibroblastide morfoloogiaga ja on peamiselt seotud kalvikestest pärineva luukoesega.

MC3T3-E1 Subclone 14 rakkude üks märkimisväärseid omadusi on nende võime diferentseeruda osteoblastideks ja osteotsüütideks. Tänu nende ulatuslikule morfoloogilisele ja funktsionaalsele sarnasusele primaarsete calvariaalsete osteoblastidega pakuvad need rakud usaldusväärset platvormi rakuvälise maatriksi (ECM) signaalimise ja osteoblastide diferentseerumisega seotud käitumise uurimiseks.

Kui MC3T3-E1 Subclone 14 rakke kasvatatakse askorbiinhappe ja anorgaanilise fosfaadi optimaalsetes kontsentratsioonides (3 kuni 4 mM), siis on neil märkimisväärne osteoblastide diferentseerumise tase. Juba kümne päeva pärast moodustavad nad hästi mineraliseerunud ECM-i, andes teadlastele võimaluse tutvuda luukoe moodustumise keerulise protsessiga.

Lisaks on leitud, et need rakud eritavad kollageeni, mis on luukoe oluline komponent, ja ekspresseerivad RNA-s hiire leukeemia inhibeerivat faktorit (MIF). Sellised omadused suurendavad nende tähtsust erinevate bioloogiliste protsesside uurimisel, mis on seotud luu arengu ja homöostaasiga. MC3T3-E1 Subclone 14 rakuliini on kasutatud ka tipptasemel teadusuuringutes.

Näiteks on seda kasutatud aktiinifilamentide tsütoskeleti analüüsi raamistiku pakkumiseks, mis annab ülevaate osteoblastide keerulisest rakusisesest arhitektuurist. Lisaks on teadlased uurinud biolagunevate magneesiumi ja magneesiumisulamite mõju nendele rakkudele, uurides nende vastastikmõju erinevate materjalidega ja nende mõju valitud raku omadustele.

Tänu oma mitmekülgsele kasutusalale on need rakud 3D-rakukultuuride uuringutes hindamatu väärtusega, pakkudes realistlikku in vitro mudelit osteoblastide käitumise ja diferentseerumise uurimiseks kolmemõõtmelises keskkonnas. Nende tähtsus ulatub mitmetesse uurimisvaldkondadesse, sealhulgas kudede insener-tehnoloogia, luu regenereerimine ja luuga seotud haiguste ravimeetodite väljatöötamine.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest