MC3T3-E1 Subclone 14

MC3T3-E1 Subclone 14 -solut ovat arvokas resurssi biologisessa tieteessä, erityisesti osteoblastien tutkimuksessa. Nämä C57BL/6-hiiren kalvariasta peräisin olevat solut valittiin huolellisesti niiden korkean alkalisen fosfataasin (ALP) aktiivisuuden perusteella lepotilassa.

Tämä ainutlaatuinen ominaisuus tekee niistä ihanteellisen mallin osteoblastien erilaistumisen ja kalkkipitoisen luukudoksen muodostumisen tutkimiseen in vitro. Preosteoblastisolutyyppinä MC3T3-E1 Subclone 14 -soluilla on fibroblastimorfologia, ja ne ovat ensisijaisesti yhteydessä calvaria-alueelta peräisin olevaan luukudokseen.

Yksi MC3T3-E1 Subclone 14 -solujen merkittävistä ominaisuuksista on niiden kyky erilaistua osteoblasteiksi ja osteosyyteiksi. Koska nämä solut muistuttavat morfologisesti ja toiminnallisesti paljon primaarisia calvariaalisia osteoblasteja, ne tarjoavat luotettavan alustan solunulkoisen matriksin (ECM) signaalien ja osteoblastien erilaistumiseen liittyvän käyttäytymisen tutkimiseen.

Kun MC3T3-E1 Subclone 14 -soluja viljellään askorbiinihapolla ja epäorgaanisella fosfaatilla optimaalisissa pitoisuuksissa (3-4 mM), ne osoittavat huomattavaa osteoblastien erilaistumista. Jo kymmenen päivän kuluttua ne muodostavat hyvin mineralisoituneen ECM:n, mikä antaa tutkijoille mahdollisuuden tutustua luukudoksen muodostumisen monimutkaiseen prosessiin.

Lisäksi näiden solujen on havaittu erittävän kollageenia, joka on luukudoksen olennainen osa, ja ne ilmentävät RNA:na hiiren leukemiaa estävää tekijää (MIF). Tällaiset ominaisuudet lisäävät niiden merkitystä luun kehitykseen ja homeostaasiin liittyvien erilaisten biologisten prosessien tutkimisessa. MC3T3-E1 Subclone 14 -solulinjaa on käytetty myös huippututkimuksessa.

Sitä on esimerkiksi hyödynnetty ehdotettaessa aktiinifilamenttien sytoskelettiä koskevaa analyysikehystä, joka tarjoaa tietoa osteoblastien monimutkaisesta solunsisäisestä arkkitehtuurista. Lisäksi tutkijat ovat selvittäneet biohajoavan magnesiumin ja magnesiumseosten vaikutuksia näihin soluihin tutkimalla niiden vuorovaikutusta eri materiaalien kanssa ja niiden vaikutusta valittuihin solun ominaisuuksiin.

Monipuolisten sovellustensa ansiosta nämä solut ovat korvaamattomia 3D-soluviljelytutkimuksissa, sillä ne tarjoavat realistisen in vitro -mallin osteoblastien käyttäytymisen ja erilaistumisen tutkimiseen kolmiulotteisessa ympäristössä. Niiden merkitys ulottuu useille tutkimusaloille, kuten kudostekniikkaan, luun uudistamiseen ja luustoon liittyvien sairauksien hoitotoimenpiteiden kehittämiseen.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa