MC3T3-E1 Subclone 14

Celice MC3T3-E1 subklon 14 so dragocen vir v biološki znanosti, zlasti pri preučevanju osteoblastov. Te celice, pridobljene iz kalvarije miši C57BL/6, so bile skrbno izbrane na podlagi visoke aktivnosti alkalne fosfataze (ALP) med mirovanjem.

Zaradi te edinstvene lastnosti so idealen model za preučevanje diferenciacije osteoblastov in nastajanja kalcificiranega kostnega tkiva in vitro. Celice MC3T3-E1 subklona 14 kot preosteoblastni tip celic imajo morfologijo fibroblastov in so primarno povezane s kostnim tkivom, pridobljenim iz kalvarije.

Ena od pomembnih značilnosti celic MC3T3-E1 Subclone 14 je njihova sposobnost diferenciacije v osteoblaste in osteocite. Zaradi velike morfološke in funkcionalne podobnosti s primarnimi kalvarijskimi osteoblasti te celice ponujajo zanesljivo platformo za preučevanje signalizacije zunajceličnega matriksa (ECM) in vedenja, povezanega z diferenciacijo osteoblastov.

Pri gojenju z askorbinsko kislino in anorganskim fosfatom v optimalnih koncentracijah (3 do 4 mM) celice MC3T3-E1 Subclone 14 izkazujejo izjemno stopnjo diferenciacije osteoblastov. Že po desetih dneh tvorijo dobro mineraliziran ECM, kar raziskovalcem omogoča vpogled v zapleten proces nastajanja kostnega tkiva.

Poleg tega je bilo ugotovljeno, da te celice izločajo kolagen, ki je bistvena sestavina kostnega tkiva, in v RNK izražajo zaviralni faktor mišje levkemije (MIF). Takšne lastnosti še dodatno prispevajo k njihovi pomembnosti pri raziskovanju različnih bioloških procesov, povezanih z razvojem in homeostazo kosti. Celična linija MC3T3-E1 Subclone 14 je bila uporabljena tudi v najsodobnejših raziskavah.

Uporabljena je bila na primer za predlog okvira za analizo citoskeleta aktinskih filamentov, ki omogoča vpogled v kompleksno znotrajcelično arhitekturo osteoblastov. Poleg tega so raziskovalci raziskali učinke biorazgradljivega magnezija in magnezijevih zlitin na te celice, preučevali njihove interakcije z različnimi materiali in njihov vpliv na izbrane celične lastnosti.

Zaradi svoje raznolike uporabe so te celice neprecenljive v študijah 3D-celičnih kultur, saj zagotavljajo realističen in vitro model za preučevanje obnašanja in diferenciacije osteoblastov v tridimenzionalnem okolju. Njihov pomen se razteza na različna raziskovalna področja, vključno s tkivnim inženiringom, regeneracijo kosti in razvojem terapevtskih posegov za bolezni, povezane s kostmi.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo