Skip to content
MC3T3-E1 Subclone 14
Tissue
עצם, גולגולת
Synonyms
MC3T3-E1 SUBCLONE 14

Documents

MC3T3-E1 Subclone 14

Cell line · Product number 305185

MC3T3-E1 Subclone 14 cells are a valuable resource in biological science, specifically in the study of osteoblasts. Derived from a C57BL/6 mouse calvaria,...

US$450.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

תאי MC3T3-E1 Subclone 14 הם משאב חשוב במדעי הביולוגיה, במיוחד במחקר של אוסטאובלסטים. תאים אלה, שמקורם בגולגולת עכבר C57BL/6, נבחרו בקפידה על סמך פעילותם הגבוהה של פוספטאז אלקליין (ALP) במצב מנוחה.

מאפיין ייחודי זה הופך אותם למודל אידיאלי לחקר התמיינות אוסטאובלסטים והיווצרות רקמת עצם מסוכרת במבחנה. כתאי אוסטאובלסט מוקדמים, תאי MC3T3-E1 Subclone 14 מציגים מורפולוגיה של פיברובלסטים וקשורים בעיקר לרקמת עצם שמקורה בגולגולת.

אחת התכונות הבולטות של תאי MC3T3-E1 Subclone 14 היא יכולתם להתמיין לאוסטאובלסטים ולאוסטאוציטים. בזכות הדמיון המורפולוגי והתפקודי הרב שלהם לאוסטאובלסטים ראשוניים של הגולגולת, תאים אלה מהווים פלטפורמה אמינה לחקר האיתות וההתנהגות של המטריצה החוץ-תאית (ECM) הקשורים להתמיינות אוסטאובלסטים.

כאשר הם מתורבתים עם חומצה אסקורבית וזרחן אנאורגני בריכוזים אופטימליים (3 עד 4 mM), תאי MC3T3-E1 Subclone 14 מפגינים רמות הבחנה מרשימות של אוסטאובלסטים. לאחר עשרה ימים בלבד, הם יוצרים ECM מינרליזציה טובה, המספקת לחוקרים הצצה לתהליך המורכב של היווצרות רקמת העצם.

יתר על כן, תאים אלה מפרישים קולגן, מרכיב חיוני ברקמת העצם, ומבטאים גורם מעכב לוקמיה עכברי (MIF) ב-RNA. מאפיינים אלה תורמים עוד יותר לרלוונטיות שלהם בחקר תהליכים ביולוגיים שונים הקשורים להתפתחות העצם ולהומאוסטזיס. קו התאים MC3T3-E1 Subclone 14 שימש גם במחקרים חדשניים.

לדוגמה, הוא שימש להציע מסגרת ניתוח של שלד התא של סיבי אקטין, המספקת תובנות על הארכיטקטורה התאית המורכבת של אוסטאובלסטים. בנוסף, חוקרים בחנו את ההשפעות של מגנזיום מתכלה וסגסוגות מגנזיום על תאים אלה, וחקרו את האינטראקציות שלהם עם חומרים שונים ואת השפעתם על תכונות תאיות נבחרות.

בזכות היישומים המגוונים שלהם, תאים אלה הם בעלי ערך רב במחקרי תרבית תאים תלת-ממדיים, ומספקים מודל מציאותי במבחנה לחקר התנהגותם והבדלתם של אוסטאובלסטים בסביבה תלת-ממדית. הרלוונטיות שלהם משתרעת על תחומי מחקר שונים, כולל הנדסת רקמות, התחדשות עצם ופיתוח התערבויות טיפוליות להפרעות הקשורות לעצמות.

Tissue
עצם, גולגולת
Applications
תרבות תאים תלת-ממדית, מחקרי הבחנה
Synonyms
  • MC3T3-E1 SUBCLONE 14

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
פיברובלסט
Tumourigenic
כן

04Identifiers

Citation
MC3T3-E1 תת-שיבוט 14 (מספר קטלוג Cytion 305185)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5437

05Expression and susceptibility

Protein expression
קולגן

06Handling and culture

Culture medium
אלפא MEM, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: ריבונוקליאוסידים, w: דוקסיריבונוקליאוסידים, w: 1.0 mM פירובט נתרן, w: 2.2g/L NaHCO3, w/o: חומצה אסקורבית (GIBCO, קטלוג מס' A1049001. אנו לא מספקים מוצר זה; אנא פנו לספקים אחרים. אנא הודיעו לנו אם אתם זקוקים לעזרה נוספת
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6
Donor age
תינוק בן יומו