MC3T3-E1 Subclone 14
Cell line · Product number 305185
MC3T3-E1 Subclone 14 cells are a valuable resource in biological science, specifically in the study of osteoblasts. Derived from a C57BL/6 mouse calvaria,...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
תאי MC3T3-E1 Subclone 14 הם משאב חשוב במדעי הביולוגיה, במיוחד במחקר של אוסטאובלסטים. תאים אלה, שמקורם בגולגולת עכבר C57BL/6, נבחרו בקפידה על סמך פעילותם הגבוהה של פוספטאז אלקליין (ALP) במצב מנוחה.
מאפיין ייחודי זה הופך אותם למודל אידיאלי לחקר התמיינות אוסטאובלסטים והיווצרות רקמת עצם מסוכרת במבחנה. כתאי אוסטאובלסט מוקדמים, תאי MC3T3-E1 Subclone 14 מציגים מורפולוגיה של פיברובלסטים וקשורים בעיקר לרקמת עצם שמקורה בגולגולת.
אחת התכונות הבולטות של תאי MC3T3-E1 Subclone 14 היא יכולתם להתמיין לאוסטאובלסטים ולאוסטאוציטים. בזכות הדמיון המורפולוגי והתפקודי הרב שלהם לאוסטאובלסטים ראשוניים של הגולגולת, תאים אלה מהווים פלטפורמה אמינה לחקר האיתות וההתנהגות של המטריצה החוץ-תאית (ECM) הקשורים להתמיינות אוסטאובלסטים.
כאשר הם מתורבתים עם חומצה אסקורבית וזרחן אנאורגני בריכוזים אופטימליים (3 עד 4 mM), תאי MC3T3-E1 Subclone 14 מפגינים רמות הבחנה מרשימות של אוסטאובלסטים. לאחר עשרה ימים בלבד, הם יוצרים ECM מינרליזציה טובה, המספקת לחוקרים הצצה לתהליך המורכב של היווצרות רקמת העצם.
יתר על כן, תאים אלה מפרישים קולגן, מרכיב חיוני ברקמת העצם, ומבטאים גורם מעכב לוקמיה עכברי (MIF) ב-RNA. מאפיינים אלה תורמים עוד יותר לרלוונטיות שלהם בחקר תהליכים ביולוגיים שונים הקשורים להתפתחות העצם ולהומאוסטזיס. קו התאים MC3T3-E1 Subclone 14 שימש גם במחקרים חדשניים.
לדוגמה, הוא שימש להציע מסגרת ניתוח של שלד התא של סיבי אקטין, המספקת תובנות על הארכיטקטורה התאית המורכבת של אוסטאובלסטים. בנוסף, חוקרים בחנו את ההשפעות של מגנזיום מתכלה וסגסוגות מגנזיום על תאים אלה, וחקרו את האינטראקציות שלהם עם חומרים שונים ואת השפעתם על תכונות תאיות נבחרות.
בזכות היישומים המגוונים שלהם, תאים אלה הם בעלי ערך רב במחקרי תרבית תאים תלת-ממדיים, ומספקים מודל מציאותי במבחנה לחקר התנהגותם והבדלתם של אוסטאובלסטים בסביבה תלת-ממדית. הרלוונטיות שלהם משתרעת על תחומי מחקר שונים, כולל הנדסת רקמות, התחדשות עצם ופיתוח התערבויות טיפוליות להפרעות הקשורות לעצמות.
- Tissue
- עצם, גולגולת
- Applications
- תרבות תאים תלת-ממדית, מחקרי הבחנה
- Synonyms
- MC3T3-E1 SUBCLONE 14
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- פיברובלסט
- Tumourigenic
- כן
04Identifiers
- Citation
- MC3T3-E1 תת-שיבוט 14 (מספר קטלוג Cytion 305185)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5437
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- קולגן
06Handling and culture
- Culture medium
- אלפא MEM, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: ריבונוקליאוסידים, w: דוקסיריבונוקליאוסידים, w: 1.0 mM פירובט נתרן, w: 2.2g/L NaHCO3, w/o: חומצה אסקורבית (GIBCO, קטלוג מס' A1049001. אנו לא מספקים מוצר זה; אנא פנו לספקים אחרים. אנא הודיעו לנו אם אתם זקוקים לעזרה נוספת
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Breed / subspecies
- C57BL/6
- Donor age
- תינוק בן יומו
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
