MC3T3-E1 Subclone 14

Komórki MC3T3-E1 Subclone 14 są cennym zasobem w naukach biologicznych, szczególnie w badaniach osteoblastów. Pochodzące z kalwarii myszy C57BL/6, komórki te zostały starannie wyselekcjonowane w oparciu o ich wysoką aktywność fosfatazy alkalicznej (ALP) w stanie spoczynku.

Ta unikalna cecha czyni je idealnym modelem do badania różnicowania osteoblastów i tworzenia zwapniałej tkanki kostnej in vitro. Jako typ komórek preosteoblastycznych, komórki MC3T3-E1 Subclone 14 wykazują morfologię fibroblastów i są głównie związane z tkanką kostną pochodzącą z kalwarii.

Jedną z godnych uwagi cech komórek MC3T3-E1 Subclone 14 jest ich zdolność do różnicowania się w osteoblasty i osteocyty. Dzięki dużemu podobieństwu morfologicznemu i funkcjonalnemu do pierwotnych osteoblastów kalwarii, komórki te stanowią niezawodną platformę do badania sygnalizacji macierzy zewnątrzkomórkowej (ECM) i zachowania związanego z różnicowaniem osteoblastów.

Podczas hodowli z kwasem askorbinowym i nieorganicznym fosforanem w optymalnych stężeniach (3 do 4 mM), komórki MC3T3-E1 Subclone 14 wykazują niezwykły poziom różnicowania osteoblastów. Po zaledwie dziesięciu dniach tworzą one dobrze zmineralizowany ECM, zapewniając naukowcom wgląd w skomplikowany proces tworzenia tkanki kostnej.

Co więcej, stwierdzono, że komórki te wydzielają kolagen, niezbędny składnik tkanki kostnej i wyrażają czynnik hamujący białaczkę mysią (MIF) w RNA. Takie cechy dodatkowo przyczyniają się do ich znaczenia w badaniu różnych procesów biologicznych związanych z rozwojem i homeostazą kości. Linia komórkowa MC3T3-E1 Subclone 14 została również wykorzystana w najnowocześniejszych badaniach.

Na przykład, została ona wykorzystana do zaproponowania ram analizy cytoszkieletu włókien aktyny, oferując wgląd w złożoną architekturę wewnątrzkomórkową osteoblastów. Ponadto naukowcy zbadali wpływ biodegradowalnego magnezu i stopów magnezu na te komórki, badając ich interakcje z różnymi materiałami i ich wpływ na wybrane właściwości komórkowe.

Dzięki różnorodnym zastosowaniom, komórki te są nieocenione w badaniach hodowli komórkowych 3D, zapewniając realistyczny model in vitro do badania zachowania i różnicowania osteoblastów w trójwymiarowym środowisku. Ich znaczenie rozciąga się na różne obszary badawcze, w tym inżynierię tkankową, regenerację kości i rozwój interwencji terapeutycznych w przypadku zaburzeń związanych z kością.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym