Skip to content
MC3T3-E1 Subclone 14
Tissue
กระดูก, กะโหลกศีรษะ
Synonyms
MC3T3-E1 SUBCLONE 14

Documents

MC3T3-E1 Subclone 14

Cell line · Product number 305185

MC3T3-E1 Subclone 14 cells are a valuable resource in biological science, specifically in the study of osteoblasts. Derived from a C57BL/6 mouse calvaria,...

€650.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ MC3T3-E1 Subclone 14 เป็นทรัพยากรที่มีคุณค่าในวิทยาศาสตร์ชีวภาพ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาเซลล์ออสทีโอบลาสต์ (osteoblasts) เซลล์เหล่านี้ได้มาจากกะโหลกศีรษะของหนูสายพันธุ์ C57BL/6 และถูกคัดเลือกอย่างพิถีพิถันโดยพิจารณาจากกิจกรรมอัลคาไลน์ฟอสฟาเตส (ALP) ที่สูงขณะอยู่ในสภาวะพัก

ลักษณะเฉพาะนี้ทำให้พวกมันเป็นแบบจำลองที่เหมาะสมสำหรับการศึกษาการแยกแยะของเซลล์ออสทีโอบลาสต์และการก่อตัวของเนื้อเยื่อกระดูกที่มีการสะสมแคลเซียมในหลอดทดลอง ในฐานะเซลล์ชนิดพรีออสทีโอบลาสต์ เซลล์ MC3T3-E1 Subclone 14 แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาของไฟโบรบลาสต์และเกี่ยวข้องกับเนื้อเยื่อกระดูกที่มาจากกะโหลกศีรษะเป็นหลัก

หนึ่งในลักษณะเด่นของเซลล์ MC3T3-E1 Subclone 14 คือความสามารถในการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ออสทีโอบลาสต์และออสทีโอไซต์ ผ่านความคล้ายคลึงทางสัณฐานวิทยาและการทำงานกับเซลล์ออสทีโอบลาสต์จากกะโหลกศีรษะของมนุษย์โดยตรง เซลล์เหล่านี้จึงเป็นแพลตฟอร์มที่น่าเชื่อถือสำหรับการศึกษาสัญญาณและพฤติกรรมของเมทริกซ์นอกเซลล์ (ECM) ที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ออสทีโอบลาสต์

เมื่อเพาะเลี้ยงด้วยกรดแอสคอร์บิกและฟอสเฟตอนินทรีย์ที่ความเข้มข้นที่เหมาะสม (3 ถึง 4 มิลลิโมลาร์) เซลล์ MC3T3-E1 Subclone 14 แสดงระดับการแยกตัวเป็นเซลล์สร้างกระดูกที่น่าทึ่ง หลังจากเพียงสิบวัน เซลล์เหล่านี้จะสร้าง ECM ที่มีแร่ธาตุสูง ซึ่งเปิดโอกาสให้นักวิจัยได้ศึกษาขั้นตอนที่ซับซ้อนของการสร้างเนื้อเยื่อกระดูก

นอกจากนี้ เซลล์เหล่านี้ยังถูกพบว่ามีคุณสมบัติในการหลั่งคอลลาเจน ซึ่งเป็นองค์ประกอบสำคัญของเนื้อเยื่อกระดูก และแสดงออกของปัจจัยยับยั้งลูคีเมียในหนู (MIF) ในรูปแบบ RNA ลักษณะดังกล่าวช่วยเสริมความสำคัญในการศึกษาวิจัยกระบวนการทางชีววิทยาต่าง ๆ ที่เกี่ยวข้องกับการพัฒนาและการรักษาสมดุลของกระดูกอีกด้วย สายพันธุ์เซลล์ MC3T3-E1 Subclone 14 ยังถูกนำมาใช้ในการวิจัยที่ล้ำสมัยอีกด้วย

ตัวอย่างเช่น ได้มีการนำไปใช้เพื่อเสนอโครงสร้างการวิเคราะห์โครงร่างเซลล์ของเส้นใยแอคติน ซึ่งช่วยให้เข้าใจถึงสถาปัตยกรรมภายในเซลล์ที่ซับซ้อนของเซลล์สร้างกระดูก นอกจากนี้ นักวิจัยยังได้ศึกษาผลกระทบของแมกนีเซียมและโลหะผสมแมกนีเซียมที่ย่อยสลายได้ทางชีวภาพต่อเซลล์เหล่านี้ โดยศึกษาปฏิสัมพันธ์กับวัสดุต่างๆ และผลกระทบต่อคุณสมบัติของเซลล์ที่เลือกไว้

ด้วยความหลากหลายในการประยุกต์ใช้งาน เซลล์เหล่านี้มีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติ โดยให้แบบจำลองในหลอดทดลองที่ใกล้เคียงกับสภาพจริงสำหรับการศึกษาพฤติกรรมและการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ออสทีโอบลาสต์ภายในสภาพแวดล้อมสามมิติ ความสำคัญของพวกมันยังขยายไปสู่หลากหลายสาขาวิจัย รวมถึงวิศวกรรมเนื้อเยื่อ การฟื้นฟูกระดูก และการพัฒนาวิธีการรักษาสำหรับโรคที่เกี่ยวข้องกับกระดูก

Tissue
กระดูก, กะโหลกศีรษะ
Applications
การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติ, การศึกษาการเปลี่ยนแปลงของเซลล์
Synonyms
  • MC3T3-E1 SUBCLONE 14

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ไฟโบรบลาสต์
Tumourigenic
ใช่

04Identifiers

Citation
MC3T3-E1 Subclone 14 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305185)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5437

05Expression and susceptibility

Protein expression
คอลลาเจน

06Handling and culture

Culture medium
อัลฟา MEM, w: กลูตามีนเสถียร 2.0 มิลลิโมลาร์, w: ไรโบนิวคลีโอไซด์, w: เดซอกซีไรโบนิวคลีโอไซด์, w: โซเดียมไพรูเวต 1.0 มิลลิโมลาร์, w: 2.2 กรัม/ลิตร NaHCO3, w/o: กรดแอสคอร์บิก (GIBCO, หมายเลขแคตตาล็อก A1049001)เราไม่ได้จัดจำหน่ายสินค้าชิ้นนี้ กรุณาพิจารณาผู้จัดจำหน่ายรายอื่น หากท่านต้องการความช่วยเหลือเพิ่มเติม กรุณาแจ้งให้เราทราบ
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6
Donor age
ทารกแรกเกิด