MC3T3-E1 Subclone 14

تُعد خلايا MC3T3-E1 Subclone 14 مورداً قيماً في العلوم البيولوجية، وتحديداً في دراسة الخلايا البانية للعظم. تم اشتقاق هذه الخلايا من خلايا الفأر C57BL/6، وتم اختيار هذه الخلايا بعناية بناءً على نشاط الفوسفاتيز القلوي العالي (ALP) أثناء الراحة.

هذه الخاصية الفريدة تجعلها نموذجًا مثاليًا لدراسة تمايز الأرومات العظمية وتكوين الأنسجة العظمية المتكلسة في المختبر. وباعتبارها أحد أنواع خلايا ما قبل الأرومة العظمية، تُظهر خلايا MC3T3-E1 Subclone 14 مورفولوجيا الأرومة الليفية وترتبط في المقام الأول بالأنسجة العظمية المستمدة من الكالفراريا.

وتتمثل إحدى السمات البارزة لخلايا MC3T3-E1 Subclone 14 في قدرتها على التمايز إلى خلايا بانيات عظمية وخلايا عظمية. ومن خلال تشابهها المورفولوجي والوظيفي الواسع النطاق مع الخلايا البانية للعظم الأولية في الكالفياريا، توفر هذه الخلايا منصة موثوقة لدراسة إشارات المصفوفة خارج الخلية (ECM) والسلوك المرتبط بتمايز الأرومات العظمية.

عندما تتم زراعتها بحمض الأسكوربيك والفوسفات غير العضوي بتركيزات مثالية (3 إلى 4 مللي مولار)، تُظهر خلايا MC3T3-E1 Subclone 14 مستويات ملحوظة من تمايز الأرومات العظمية. وبعد عشرة أيام فقط، تشكل هذه الخلايا نسيجًا متماسكًا معدنيًا جيدًا، مما يوفر للباحثين نافذة على العملية المعقدة لتكوين أنسجة العظام.

وعلاوة على ذلك، وُجد أن هذه الخلايا تفرز الكولاجين، وهو مكون أساسي لأنسجة العظام، وتعبر عن العامل المثبط لسرطان الدم الفيروسي (MIF) في الحمض النووي الريبي. وتساهم هذه الخصائص في زيادة أهميتها في دراسة مختلف العمليات البيولوجية المتعلقة بتطور العظام وتوازنها. كما تم استخدام خط الخلية MC3T3-E1 Subclone 14 في أبحاث متطورة.

فعلى سبيل المثال، تم استخدامه لاقتراح إطار عمل لتحليل الهيكل الخلوي لخيوط الأكتين مما يوفر نظرة ثاقبة للبنية المعقدة داخل الخلايا في بانيات العظم. بالإضافة إلى ذلك، قام الباحثون باستكشاف تأثيرات المغنيسيوم وسبائك المغنيسيوم القابلة للتحلل الحيوي على هذه الخلايا، ودراسة تفاعلاتها مع المواد المختلفة وتأثيرها على خصائص خلوية مختارة.

وبفضل تطبيقاتها المتنوعة، فإن هذه الخلايا لا تقدر بثمن في دراسات زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد، حيث توفر نموذجاً واقعياً في المختبر لدراسة سلوك الأرومات العظمية وتمايزها في بيئة ثلاثية الأبعاد. وتمتد أهميتها إلى مختلف المجالات البحثية، بما في ذلك هندسة الأنسجة وتجديد العظام وتطوير التدخلات العلاجية للاضطرابات المتعلقة بالعظام.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان