NCI-H1781

La lignée cellulaire NCI-H1781 est un modèle de carcinome pulmonaire non à petites cellules (CPNPC) humain dérivé d’un adénocarcinome pulmonaire. Cette lignée cellulaire se distingue notamment par la présence de la mutation ERBB2 (HER2) G776insV_G/C, une insertion dans le cadre de lecture de l’exon 20 qui a un effet activateur sur le plan fonctionnel. De telles mutations sont reconnues comme des facteurs déterminants dans un sous-groupe de cancers du poumon et font de la lignée NCI-H1781 un modèle utile pour l’étude des thérapies ciblant HER2 et des mécanismes de résistance. La mutation ERBB2 présente dans la lignée NCI-H1781 contribue à l’activation constitutive de la kinase et à la signalisation en aval par l’intermédiaire de voies telles que PI3K/AKT et MAPK, favorisant ainsi la prolifération et la survie cellulaires indépendamment de tout facteur de croissance externe.

Dans les études de profilage moléculaire, la lignée NCI-H1781 présente des niveaux élevés de transcrit et de protéine ERBB2, ce qui correspond à son altération génétique. De plus, cette lignée cellulaire est souvent utilisée dans les recherches pharmacogénomiques, car sa sensibilité aux inhibiteurs de HER2, tels que le lapatinib ou l’afatinib, peut varier en fonction du contexte cellulaire et des stratégies de ciblage combinatoires. Elle présente également une résistance aux inhibiteurs de l’EGFR, ce qui la distingue des modèles de cancer du poumon à mutation de l’EGFR et souligne la pertinence thérapeutique d’un ciblage spécifique de HER2. Compte tenu de son profil génétique bien caractérisé et de ses propriétés de croissance robustes in vitro, la lignée NCI-H1781 constitue un modèle préclinique fiable pour tester des composés ciblant HER2 et explorer les mécanismes de résistance thérapeutique dans l’adénocarcinome du poumon.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.