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NCI-H1781
Tessuto
Metastatico
Malattia
Adenocarcinoma polmonare minimamente invasivo
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
H1781, H-1781, NCIH1781

Documenti

NCI-H1781

Cell line · Codice prodotto 305731

The NCI-H1781 cell line is a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC) model derived from a lung adenocarcinoma. This cell line is particularly notewort...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare NCI-H1781 è un modello di carcinoma polmonare umano non a piccole cellule (NSCLC) derivato da un adenocarcinoma polmonare. Questa linea cellulare è particolarmente degna di nota perché ospita la mutazione ERBB2 (HER2) G776insV_G/C, un'inserzione in-frame nell'esone 20 che è funzionalmente attivante. Tali mutazioni sono note in un sottogruppo di tumori polmonari e rendono NCI-H1781 un modello utile per lo studio delle terapie mirate a HER2 e dei meccanismi di resistenza. La mutazione ERBB2 in NCI-H1781 contribuisce all'attivazione costitutiva della chinasi e alla segnalazione a valle attraverso vie quali PI3K/AKT e MAPK, sostenendo così la proliferazione e la sopravvivenza delle cellule indipendentemente da fattori di crescita esterni.

Negli studi di profiling molecolare, NCI-H1781 mostra livelli elevati di trascrizione e proteina ERBB2, coerenti con la sua alterazione genetica. Inoltre, questa linea cellulare è spesso impiegata nelle indagini farmacogenomiche, poiché la sua sensibilità agli inibitori di HER2, come lapatinib o afatinib, può variare a seconda del contesto cellulare e delle strategie di targeting combinatorio. Presenta inoltre resistenza agli inibitori dell'EGFR, il che lo distingue dai modelli di tumore polmonare mutanti per l'EGFR e sottolinea la rilevanza terapeutica del targeting HER2-specifico. Dato il suo background genetico ben caratterizzato e le robuste proprietà di crescita in vitro, l'NCI-H1781 è un modello preclinico affidabile per testare composti mirati a HER2 ed esplorare i meccanismi di resistenza terapeutica nell'adenocarcinoma polmonare.

Tessuto
Metastatico
Malattia
Adenocarcinoma polmonare minimamente invasivo
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
  • H1781
  • H-1781
  • NCIH1781

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Identificatori

Riferimento bibliografico
NCI-H1781 (catalogo Cytion numero 305731)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1494

04Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: PTEN, semplice, p.Gln245fs*6 (c.735_739delGCCGT), eterozigote, TP53, semplice, p.Val157Phe (c.469G>T), omozigote

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
66 anni
Etnia
Caucasico