NCI-H1781

A linha celular NCI-H1781 é um modelo de carcinoma do pulmão humano de células não pequenas (NSCLC) derivado de um adenocarcinoma do pulmão. Esta linha celular é particularmente notável por albergar a mutação ERBB2 (HER2) G776insV_G/C, uma inserção in-frame no exão 20 que é funcionalmente activadora. Estas mutações são factores determinantes conhecidos num subconjunto de cancros do pulmão e fazem do NCI-H1781 um modelo útil para o estudo de terapias orientadas para o HER2 e de mecanismos de resistência. A mutação do ERBB2 no NCI-H1781 contribui para a ativação constitutiva da quinase e para a sinalização a jusante através de vias como a PI3K/AKT e a MAPK, apoiando assim a proliferação e a sobrevivência das células independentemente de factores de crescimento externos.

Em estudos de perfis moleculares, a NCI-H1781 demonstra níveis elevados de transcrição e proteína ERBB2, consistentes com a sua alteração genética. Além disso, esta linha celular é frequentemente utilizada em investigações farmacogenómicas, uma vez que a sua sensibilidade aos inibidores do HER2, como o lapatinib ou o afatinib, pode variar em função do contexto celular e das estratégias combinatórias de seleção. Apresenta também resistência aos inibidores do EGFR, o que a distingue dos modelos de cancro do pulmão com mutação do EGFR e sublinha a relevância terapêutica do tratamento específico do HER2. Dado o seu contexto genético bem caracterizado e as suas robustas propriedades de crescimento in vitro, o NCI-H1781 constitui um modelo pré-clínico fiável para testar compostos dirigidos ao HER2 e explorar os mecanismos de resistência terapêutica no adenocarcinoma do pulmão.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia