NCI-H1781

A linhagem celular NCI-H1781 é um modelo de carcinoma pulmonar de células não pequenas (NSCLC) humano derivado de um adenocarcinoma pulmonar. Essa linha celular é particularmente notável por apresentar a mutação G776insV_G/C no gene ERBB2 (HER2), uma inserção no quadro de leitura do exão 20 que atua como ativadora funcional. Tais mutações são conhecidas como fatores impulsionadores em um subconjunto de cânceres de pulmão e tornam a NCI-H1781 um modelo útil para o estudo de terapias direcionadas ao HER2 e de mecanismos de resistência. A mutação no ERBB2 na NCI-H1781 contribui para a ativação constitutiva da quinase e para a sinalização a jusante por meio de vias como PI3K/AKT e MAPK, promovendo assim a proliferação e a sobrevivência celular independentemente de fatores de crescimento externos.

Em estudos de perfil molecular, a NCI-H1781 apresenta níveis elevados de transcrito e proteína ERBB2, o que é consistente com sua alteração genética. Além disso, essa linhagem celular é frequentemente empregada em investigações farmacogenômicas, já que sua sensibilidade a inibidores de HER2, como lapatinibe ou afatinibe, pode variar dependendo do contexto celular e das estratégias de direcionamento combinatório. Ela também apresenta resistência a inibidores de EGFR, o que a distingue dos modelos de câncer de pulmão com mutação no EGFR e ressalta a relevância terapêutica do direcionamento específico ao HER2. Devido ao seu perfil genético bem caracterizado e às suas propriedades de crescimento robustas in vitro, a NCI-H1781 serve como um modelo pré-clínico confiável para testar compostos direcionados ao HER2 e explorar mecanismos de resistência terapêutica no adenocarcinoma de pulmão.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.