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NCI-H2347
Tissue
Poumon
Disease
Adénocarcinome pulmonaire
Synonyms
NCI-H2347, H-2347, NCIH2347

Documents

NCI-H2347

Cell line · Product number 305139

The NCI-H2347 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line derived from a lung adenocarcinoma. This cell line is widely used in studi...

US$395.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

La lignée cellulaire NCI-H2347 est une lignée cellulaire humaine de cancer du poumon à cellules non petites (CPNCP) dérivée d’un adénocarcinome pulmonaire. Cette lignée cellulaire est largement utilisée dans les études sur la biologie du cancer du poumon, en particulier pour les recherches portant sur les mutations des gènes suppresseurs de tumeurs et les voies impliquées dans l’apoptose, la résistance à la chimiothérapie et les thérapies anticancéreuses à base de virus. La lignée NCI-H2347 possède un gène p53 de type sauvage, ce qui la distingue de nombreuses lignées cellulaires de cancer du poumon porteuses de mutations du gène p53; elle constitue donc un modèle pertinent pour étudier les différences de réponse thérapeutique en fonction du statut du gène p53.

Cette lignée cellulaire a été utilisée dans des expériences visant à tester l’efficacité de nouveaux traitements tels que l’ONYX-015, un adénovirus génétiquement modifié qui se réplique de manière sélective dans les cellules tumorales présentant un gène p53 non fonctionnel et les lyse. Alors que l’ONYX-015 s’est révélé très efficace dans les lignées cellulaires de cancer du poumon présentant des mutations du gène p53, comme la NCI-H522, son effet sur la NCI-H2347, qui possède un gène p53 de type sauvage, s’est avéré limité. De plus, la lignée NCI-H2347 a fait l’objet d’études portant sur la voie de signalisation MET, notamment en lien avec la résistance aux inhibiteurs de la tyrosine kinase de l’EGFR (ITK). Il a été démontré que, bien qu’aucune amplification du gène MET ne soit observée dans cette lignée cellulaire, sa protéine MET peut tout de même être activée par des mutations de l’EGFR, ce qui suggère une interaction complexe entre les voies de signalisation MET et EGFR.

Tissue
Poumon
Disease
Adénocarcinome pulmonaire
Synonyms
  • NCI-H2347
  • H-2347
  • NCIH2347

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Épithélial

04Identifiers

Citation
NCI-H2347 (numéro de catalogue Cytion 305139)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1550

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donor

Donor age
54 ans
Ethnicity
européen