Pāriet uz saturu
NCI-H2347
Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu adenokarcinoma
Sinonīmi
NCI-H2347, H-2347, NCIH2347

Dokumenti

NCI-H2347

Cell line · Preces numurs 305139

The NCI-H2347 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line derived from a lung adenocarcinoma. This cell line is widely used in studi...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NCI-H2347 šūnu līnija ir no plaušu adenokarcinomas iegūta cilvēka plaušu adenokarcinomas (NSCLC) šūnu līnija. Šo šūnu līniju plaši izmanto plaušu vēža bioloģijas pētījumos, jo īpaši pētījumos, kas saistīti ar audzēja supresoru gēnu mutācijām un ceļiem, kas saistīti ar apoptozi, rezistenci pret ķīmijterapiju un uz vīrusiem balstītu vēža terapiju. NCI-H2347 ir savvaļas tipa p53, kas atšķiras no daudzām plaušu vēža šūnu līnijām, kurās ir p53 mutācijas, tāpēc tā ir piemērots modelis, lai pētītu terapeitiskās atbildes reakcijas atšķirības atkarībā no p53 statusa.

Šī šūnu līnija ir izmantota eksperimentos, lai pārbaudītu tādu jaunu ārstēšanas metožu efektivitāti kā ONYX-015 - ģenētiski modificēts adenovīruss, kas selektīvi replicējas audzēja šūnās ar nefunkcionējošu p53 un iznīcina tās. Lai gan ONYX-015 bija ļoti efektīvs plaušu vēža šūnu līnijās ar p53 mutācijām, piemēram, NCI-H522, tā iedarbība uz NCI-H2347, kurai ir savvaļas tipa p53, bija ierobežota. Turklāt NCI-H2347 tika iesaistīta pētījumos, kuros galvenā uzmanība tika pievērsta MET signalizācijai, jo īpaši saistībā ar rezistenci pret EGFR tirozīnkināzes inhibitoriem (TKI). Ir pierādīts, ka, lai gan šajā šūnu līnijā nav novērota MET gēna amplifikācija, tās MET proteīnu joprojām var aktivizēt EGFR mutācijas, kas liecina par sarežģītu mijiedarbību starp MET un EGFR signalizācijas ceļiem.

Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu adenokarcinoma
Sinonīmi
  • NCI-H2347
  • H-2347
  • NCIH2347

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
NCI-H2347 (Cytion kataloga numurs 305139)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1550

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
54 gadi
Etniskā piederība
Eiropas