NCI-H2347

A linhagem celular NCI-H2347 é uma linhagem de câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC) derivada de um adenocarcinoma pulmonar. Essa linhagem é amplamente utilizada em estudos sobre a biologia do câncer de pulmão, particularmente em pesquisas envolvendo mutações em genes supressores de tumor e vias relacionadas à apoptose, resistência à quimioterapia e terapias oncológicas baseadas em vírus. A NCI-H2347 possui o p53 do tipo selvagem, o que contrasta com muitas linhas celulares de câncer de pulmão que apresentam mutações no p53, tornando-a um modelo relevante para o estudo das diferenças na resposta terapêutica com base no status do p53.

Essa linhagem celular tem sido utilizada em experimentos para testar a eficácia de novos tratamentos, como o ONYX-015, um adenovírus geneticamente modificado que se replica seletivamente em células tumorais com p53 não funcional e as lisa. Embora o ONYX-015 tenha se mostrado altamente eficaz em linhagens celulares de câncer de pulmão com mutações no p53, como a NCI-H522, seu efeito na NCI-H2347, que possui p53 do tipo selvagem, foi limitado. Além disso, a NCI-H2347 tem sido envolvida em estudos com foco na sinalização do MET, particularmente em relação à resistência aos inibidores da tirosina quinase (TKIs) do EGFR. Foi demonstrado que, embora a amplificação do gene MET não seja observada nessa linhagem celular, sua proteína MET ainda pode ser ativada por mutações no EGFR, sugerindo uma interação complexa entre as vias de sinalização do MET e do EGFR.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.