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NCI-H2347
Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Adenocarcinoma de pulmón
Sinónimos
NCI-H2347, H-2347, NCIH2347

Documentos

NCI-H2347

Cell line · Número de producto 305139

The NCI-H2347 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line derived from a lung adenocarcinoma. This cell line is widely used in studi...

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Recomendado (lote más fresco)
1

01Información general

Descripción

La línea celular NCI-H2347 es una línea celular humana de cáncer de pulmón no microcítico (CPNM) derivada de un adenocarcinoma de pulmón. Esta línea celular se utiliza ampliamente en estudios sobre la biología del cáncer de pulmón, en particular para la investigación de mutaciones de genes supresores de tumores y vías relacionadas con la apoptosis, la resistencia a la quimioterapia y las terapias contra el cáncer basadas en virus. El NCI-H2347 tiene p53 de tipo salvaje, lo que contrasta con muchas líneas celulares de cáncer de pulmón que albergan mutaciones de p53, lo que lo convierte en un modelo relevante para estudiar las diferencias en la respuesta terapéutica en función del estado de p53.

Esta línea celular se ha utilizado en experimentos para probar la eficacia de tratamientos novedosos como ONYX-015, un adenovirus modificado genéticamente que se replica selectivamente en células tumorales con p53 no funcional y las destruye. Aunque ONYX-015 fue muy eficaz en líneas celulares de cáncer de pulmón con mutaciones en p53, como NCI-H522, su efecto en NCI-H2347, que tiene p53 de tipo salvaje, fue limitado. Además, el NCI-H2347 ha participado en estudios centrados en la señalización MET, sobre todo en relación con la resistencia a los inhibidores de la tirosina quinasa (TKI) del EGFR. Se ha demostrado que, aunque en esta línea celular no se observa amplificación del gen MET, su proteína MET puede seguir siendo activada por mutaciones del EGFR, lo que sugiere una compleja interacción entre las vías de señalización MET y EGFR.

Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Adenocarcinoma de pulmón
Sinónimos
  • NCI-H2347
  • H-2347
  • NCIH2347

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Epitelial

04Identificadores

Referencia
NCI-H2347 (número de catálogo 305139 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1550

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
54 años
Origen étnico
Europea