Ga naar de inhoud
NCI-H2347
Weefsel
Long
Ziekte
Longadenocarcinoom
Synoniemen
NCI-H2347, H-2347, NCIH2347

Documenten

NCI-H2347

Cell line · Productnummer 305139

The NCI-H2347 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line derived from a lung adenocarcinoma. This cell line is widely used in studi...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De NCI-H2347 cellijn is een menselijke niet-kleincellige longkanker (NSCLC) cellijn afgeleid van een longadenocarcinoom. Deze cellijn wordt veel gebruikt in studies naar de biologie van longkanker, met name voor onderzoek naar tumorsuppressorgenmutaties en pathways waarbij apoptose, resistentie tegen chemotherapie en virale kankertherapieën een rol spelen. NCI-H2347 heeft wild-type p53, wat in contrast staat met veel longkankercellijnen die p53-mutaties bevatten, waardoor het een relevant model is voor het bestuderen van de verschillen in therapeutische respons op basis van p53-status.

Deze cellijn is gebruikt in experimenten om de werkzaamheid van nieuwe behandelingen te testen, zoals ONYX-015, een genetisch gemodificeerd adenovirus dat zich selectief vermenigvuldigt in tumorcellen met niet-functioneel p53 en deze vernietigt. Terwijl ONYX-015 zeer effectief was in longkankercellijnen met p53-mutaties, zoals NCI-H522, was het effect op NCI-H2347, die wild-type p53 heeft, beperkt. Daarnaast is NCI-H2347 betrokken geweest bij onderzoeken naar MET signalering, met name in relatie tot resistentie tegen EGFR tyrosinekinaseremmers (TKI's). Er is aangetoond dat, hoewel MET-genamplificatie niet wordt waargenomen in deze cellijn, het MET-eiwit nog steeds kan worden geactiveerd door EGFR-mutaties, wat duidt op een complexe wisselwerking tussen MET- en EGFR-signaalroutes.

Weefsel
Long
Ziekte
Longadenocarcinoom
Synoniemen
  • NCI-H2347
  • H-2347
  • NCIH2347

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NCI-H2347 (Cytion-catalogusnummer 305139)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1550

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
54 jaar
Etnische afkomst
Europese