Skip to content
NCI-H2347
Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งต่อมน้ำเหลืองในปอด
Synonyms
NCI-H2347, H-2347, NCIH2347

Documents

NCI-H2347

Cell line · Product number 305139

The NCI-H2347 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line derived from a lung adenocarcinoma. This cell line is widely used in studi...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

สายเซลล์ NCI-H2347 เป็นสายเซลล์มะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์ขนาดเล็ก (NSCLC) ของมนุษย์ที่ได้มาจากมะเร็งอะดีโนคาร์ซิโนมาของปอด สายเซลล์นี้ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งปอด โดยเฉพาะในงานวิจัยที่เกี่ยวข้องกับการกลายพันธุ์ของยีนกดการเกิดมะเร็งและเส้นทางที่เกี่ยวข้องกับการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส การดื้อยาเคมีบำบัด และการบำบัดมะเร็งโดยใช้ไวรัสNCI-H2347 มี p53 ชนิดปกติ ซึ่งตรงข้ามกับเซลล์มะเร็งปอดหลายสายพันธุ์ที่มีการกลายพันธุ์ของ p53 ทำให้เป็นแบบจำลองที่เกี่ยวข้องสำหรับการศึกษาความแตกต่างในการตอบสนองต่อการรักษาตามสถานะของ p53

เซลล์ไลน์นี้ได้ถูกนำมาใช้ในทดลองเพื่อทดสอบประสิทธิภาพของการรักษาใหม่ ๆ เช่น ONYX-015 ซึ่งเป็นอะดีโนไวรัสที่ถูกดัดแปลงทางพันธุกรรมให้สามารถคัดลอกตัวเองและทำลายเซลล์มะเร็งที่มีโปรตีน p53 ที่ไม่สามารถทำงานได้ในขณะที่ ONYX-015 มีประสิทธิภาพสูงในเซลล์มะเร็งปอดที่มีการกลายพันธุ์ของ p53 เช่น NCI-H522 แต่ผลของมันต่อ NCI-H2347 ซึ่งมี p53 แบบปกติ กลับมีจำกัดนอกจากนี้ NCI-H2347 ยังมีส่วนร่วมในการศึกษาที่มุ่งเน้นไปที่การส่งสัญญาณ MET โดยเฉพาะอย่างยิ่งในความสัมพันธ์กับการดื้อยาของ EGFR tyrosine kinase inhibitors (TKIs) ได้มีการแสดงให้เห็นว่าแม้จะไม่พบการเพิ่มจำนวนของยีน MET ในเซลล์ไลน์นี้ แต่โปรตีน MET ของมันยังสามารถถูกกระตุ้นได้โดยการกลายพันธุ์ของ EGFR ซึ่งบ่งชี้ถึงปฏิสัมพันธ์ที่ซับซ้อนระหว่างเส้นทางการส่งสัญญาณ MET และ EGFR

Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งต่อมน้ำเหลืองในปอด
Synonyms
  • NCI-H2347
  • H-2347
  • NCIH2347

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
NCI-H2347 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305139)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1550

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
54 ปี
Ethnicity
ยุโรป