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NCI-H2347
Gewebe
Lunge
Krankheit
Adenokarzinom der Lunge
Synonyme
NCI-H2347, H-2347, NCIH2347

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NCI-H2347

Cell line · Artikelnummer 305139

The NCI-H2347 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line derived from a lung adenocarcinoma. This cell line is widely used in studi...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die NCI-H2347-Zelllinie ist eine menschliche Zelllinie für nicht-kleinzelligen Lungenkrebs (NSCLC), die von einem Lungenadenokarzinom abstammt. Diese Zelllinie wird häufig für Studien zur Biologie des Lungenkrebses verwendet, insbesondere für die Erforschung von Mutationen von Tumorsuppressorgenen und von Signalwegen, die mit Apoptose, Chemotherapieresistenz und viralen Krebstherapien zu tun haben. NCI-H2347 hat Wildtyp-p53, was im Gegensatz zu vielen Lungenkrebs-Zelllinien steht, die p53-Mutationen aufweisen, was sie zu einem relevanten Modell für die Untersuchung der Unterschiede im therapeutischen Ansprechen je nach p53-Status macht.

Diese Zelllinie wurde in Experimenten verwendet, um die Wirksamkeit neuartiger Behandlungen wie ONYX-015 zu testen, ein genetisch verändertes Adenovirus, das sich selektiv in Tumorzellen mit nicht funktionierendem p53 repliziert und diese lysiert. Während ONYX-015 bei Lungenkrebs-Zelllinien mit p53-Mutationen, wie NCI-H522, hochwirksam war, war seine Wirkung auf NCI-H2347, das Wildtyp-p53 hat, begrenzt. Darüber hinaus wurde NCI-H2347 in Studien einbezogen, die sich mit der MET-Signalübertragung befassten, insbesondere im Zusammenhang mit der Resistenz gegen EGFR-Tyrosinkinase-Inhibitoren (TKI). Es hat sich gezeigt, dass diese Zelllinie zwar keine MET-Genamplifikation aufweist, ihr MET-Protein aber dennoch durch EGFR-Mutationen aktiviert werden kann, was auf ein komplexes Zusammenspiel zwischen MET- und EGFR-Signalwegen schließen lässt.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Adenokarzinom der Lunge
Synonyme
  • NCI-H2347
  • H-2347
  • NCIH2347

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
NCI-H2347 (Cytion-Katalognummer 305139)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1550

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
54 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch