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NCI-H2347
Tessuto
Polmone
Malattia
Adenocarcinoma polmonare
Sinonimi
NCI-H2347, H-2347, NCIH2347

Documenti

NCI-H2347

Cell line · Codice prodotto 305139

The NCI-H2347 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line derived from a lung adenocarcinoma. This cell line is widely used in studi...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

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1

01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare NCI-H2347 è una linea cellulare umana di carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC) derivata da un adenocarcinoma polmonare. Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata negli studi sulla biologia del cancro del polmone, in particolare per la ricerca sulle mutazioni dei geni soppressori del tumore e sui percorsi che coinvolgono l'apoptosi, la resistenza alla chemioterapia e le terapie oncologiche basate su virus. NCI-H2347 ha p53 di tipo selvaggio, il che contrasta con molte linee cellulari di cancro del polmone che ospitano mutazioni di p53, rendendolo un modello rilevante per studiare le differenze nella risposta terapeutica in base allo stato di p53.

Questa linea cellulare è stata utilizzata in esperimenti per testare l'efficacia di nuovi trattamenti come ONYX-015, un adenovirus geneticamente modificato che si replica selettivamente nelle cellule tumorali con p53 non funzionale e le liscia. Mentre l'ONYX-015 è stato molto efficace nelle linee cellulari di cancro al polmone con mutazioni della p53, come l'NCI-H522, il suo effetto sull'NCI-H2347, che ha una p53 wild-type, è stato limitato. Inoltre, NCI-H2347 è stato coinvolto in studi incentrati sulla segnalazione di MET, in particolare in relazione alla resistenza agli inibitori della tirosin-chinasi (TKI) di EGFR. È stato dimostrato che, sebbene in questa linea cellulare non si osservi l'amplificazione del gene MET, la sua proteina MET può comunque essere attivata da mutazioni dell'EGFR, suggerendo una complessa interazione tra le vie di segnalazione di MET ed EGFR.

Tessuto
Polmone
Malattia
Adenocarcinoma polmonare
Sinonimi
  • NCI-H2347
  • H-2347
  • NCIH2347

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
NCI-H2347 (catalogo Cytion numero 305139)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1550

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
54 anni
Etnia
Europeo