תאים 769-P
Cell line · Product number 300106
The 769-P cell line is a human renal cell carcinoma (RCC) cell line that was derived from a nephrectomy specimen of a 63-year-old female patient with rena...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים 769-P הוא קו תאים של קרצינומה של תאי כליה אנושיים (RCC) שהופק מדגימת נפרקטומיה של מטופלת בת 63 עם אדנוקרצינומה של תאי כליה בשנת 1975. הוא נמצא בשימוש נרחב במחקר על סרטן תאי כליה, ובפרט קרצינומה של תאי כליה שקופים (ccRCC), שהוא הסוג הנפוץ והקטלני ביותר של סרטן כליה בקרב מבוגרים.
קו התאים 769-P שומר על מאפיינים רבים של RCC ראשוני ומכיל מספר מוטציות הרלוונטיות לסרטן תאי הכליה. תאים אלה מפגינים אובדן תפקוד בגן מדכא הגידול von Hippel-Lindau (VHL), שהוא גן חשוב בסרטן הכליה ב-ccRCC, שיכול להפעיל מסלולים אונקוגניים שונים, כולל אנגיוגנזה, התרבות תאים ותכנות מחדש של חילוף החומרים.
קו התאים 769-P משמש להבנת המנגנונים המולקולריים של פתוגנזה של סרטן הכליה, לחקר היעילות של תרופות נגד סרטן ולחקר המנגנונים של עמידות לתרופות. תאים אלה שימושיים במיוחד לחקר התגובה למעכבי טירוזין קינאז (TKIs), שהם סוג של טיפולים ממוקדים המשמשים לטיפול ב-RCC ובסוגים משניים של RCC.
קו התאים 769-P של סרטן הכליה משמש גם לחקר תפקידה של הסביבה המיקרו-סביבתית של הגידול בסרטן הכליה ולחקר תהליכים תאיים כגון אפופטוזיס, ויסות מחזור התא ופוטנציאל גרורתי. תגובתם לתנאים היפוקסיים הופכת אותם למתאימים למחקר על האופן שבו ccRCC מסתגל ומשגשג בסביבות דלות חמצן הנמצאות בגידולים מוצקים.
לסיכום, קו התאים 769-P וקווי תאים אחרים של RCC הם כלים חיוניים במחקר על קרצינומה של הכליה, המספקים תובנות על הפתוגנזה של ccRCC, יעילות התרופות ומנגנוני העמידות.
- Tissue
- כליה
- Disease
- קרצינומה של תאי הכליה
- Synonyms
- 769P
- 769-p
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- יוצר גידולים בחולדות עם דיכוי חיסוני ובעכברים עירומים
- Ploidy status
- קו תאים זה הכיל מספר גבוה של תאים טטרה-, הקסה- ופלואידים גבוהים יותר (אוכלוסיות 2s). האוכלוסייה הנפוצה ביותר (32% מהתאים) הייתה בעלת קריוטיפ פסאודו-דיפלואידי של 46,xx,-3,-18,del(7) (q21.12,q22.3), ?t(3q?18q).
- Karyotype
- היפודיפלואידי. מספר מודאלי = 45. כרומוזום תת-מרכזתי גדול היה נוכח בכל התאים.
- Doubling time
- 35 שעות
04Identifiers
- Citation
- 769-P (מספר קטלוגי Cytion 300106)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1050
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 3 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה חד-תאית מלוכדת תוך 4 ימים.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחו את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניחו לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 48 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Donor age
- 63 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
