Siirry sisältöön
769-P Kennot
Kudos
Munuaiset
Sairaus
Munuaissolusyöpä
Synonyymit
769P, 769-p

Asiakirjat

769-P Kennot

Cell line · Tuotenumero 300106

769-P-solulinja on ihmisen munuaissyövän (RCC) solulinja, joka on peräisin 63-vuotiaan naispotilaan munuaisenpoistoleikkauksessa otetusta näytteestä, jolla oli munua...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

769-P-solulinja on ihmisen munuaissolusyövän (RCC) solulinja, joka on peräisin 63-vuotiaan naispotilaan, jolla oli munuaissolujen adenokarsinooma, vuonna 1975 tehdystä nefrektomiasta. Sitä käytetään laajalti munuaissolusyöpätutkimuksissa, erityisesti kirkassoluisen munuaissolusyövän (ccRCC) tutkimuksessa, joka on yleisin ja tappavin munuaissyövän muoto aikuisilla.

Solulinjassa 769-P on monia primaarisen RCC:n ominaisuuksia, ja siinä on useita munuaissolusyövän kannalta merkityksellisiä mutaatioita. Niillä on toimintakato von Hippel-Lindau (VHL) -kasvainsuppressorigeenissä, joka on tärkeä munuaissyöpägeeni ccRCC:ssä ja joka voi aktivoida erilaisia onkogeenisiä reittejä, kuten angiogeneesiä, solujen proliferaatiota ja aineenvaihdunnan uudelleenohjelmointia.

Solulinjaa 769-P käytetään munuaissyövän patogeneesin molekyylimekanismien ymmärtämiseen, syöpälääkkeiden tehokkuuden tutkimiseen ja lääkeresistenssin mekanismien tutkimiseen. Nämä solut ovat erityisen käyttökelpoisia tutkittaessa vastetta tyrosiinikinaasin estäjille (TKI), jotka ovat RCC:n ja RCC:n alatyyppien hoidossa käytettävien kohdennettujen hoitojen luokka.

Munuaissyöpäsolulinjaa 769-P käytetään lisäksi kasvaimen mikroympäristön roolin tutkimiseen munuaissyövässä ja soluprosessien, kuten apoptoosin, solusyklin säätelyn ja metastaattisen potentiaalin, tutkimiseen. Koska ne reagoivat herkästi hypoksisiin olosuhteisiin, ne soveltuvat tutkimukseen, jossa selvitetään, miten syöpäsolusyöpä sopeutuu ja menestyy kiinteissä kasvaimissa esiintyvässä vähähappisessa ympäristössä.

Yhteenvetona voidaan todeta, että 769-P-solulinja ja muut RCC-solulinjat ovat korvaamattomia välineitä munuaissyöpätutkimuksessa, sillä ne tarjoavat tietoa ccRCC:n patogeneesistä, lääkkeiden tehosta ja resistenssimekanismeista.

Kudos
Munuaiset
Sairaus
Munuaissolusyöpä
Synonyymit
  • 769P
  • 769-p

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Muodostaa kasvaimia immunosuppressoiduissa hamstereissa ja nude-hiirissä
Ploidisuus
Tässä solulinjassa oli runsaasti tetra-, heksa- ja korkeampiploidisia soluja (2s-populaatioita). Yleisimmän solupopulaation (32 % soluista) pseudodiploidinen karyotyyppi oli 46,xx,-3,-18,del(7) (q21.12,q22.3), ?t(3q?18q).
Karyotyyppi
Hypodiploidi. Modaaliluku = 45. Kaikissa soluissa oli suuri submetasentrinen kromosomi.
Kaksinkertaistumisaika
35 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
769-P (Cytionin luettelonumero 300106)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1050

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
3 x 104 solua/cm2 tuottaa yhtenäisen yksikerroksen 4 päivän kuluessa.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua jäädyttämisprosessista ja kiinnittyä vähintään 48 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
63 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen