Přejít na obsah
769-P Buňky
Tkáň
Ledviny
Nemoc
Karcinom ledviny
Synonyma
769P, 769-p

Dokumenty

769-P Buňky

Cell line · Číslo výrobku 300106

Buněčná linie 769-P je buněčná linie lidského karcinomu ledvin (RCC), která byla izolována z vzorku odebraného při nefrektomii u 63leté pacientky s ren...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie 769-P je buněčná linie lidského renálního karcinomu (RCC), která byla získána ze vzorku nefrektomie 63leté pacientky s adenokarcinomem ledviny v roce 1975. Je široce využívána ve výzkumu karcinomu ledvin, zejména světlobuněčného karcinomu ledvin (ccRCC), který je nejčastější a nejsmrtelnější formou karcinomu ledvin u dospělých.

Buněčná linie 769-P si zachovává mnoho charakteristik primárního RCC a obsahuje několik mutací, které jsou důležité pro karcinom ledviny. Vykazují ztrátu funkce von Hippel-Lindauova (VHL) tumor supresorového genu, který je u ccRCC důležitým genem pro karcinom ledviny, jenž může aktivovat různé onkogenní dráhy včetně angiogeneze, buněčné proliferace a metabolického přeprogramování.

Buněčná linie 769-P se používá k pochopení molekulárních mechanismů patogeneze karcinomu ledviny, ke zkoumání účinnosti protinádorových léčiv a k výzkumu mechanismů rezistence na léčiva. Tyto buňky jsou zvláště užitečné pro studium odpovědi na inhibitory tyrozinkinázy (TKI), což je třída cílených terapií používaných při léčbě RCC a podtypů RCC.

Buněčná linie karcinomu ledviny 769-P se dále používá ke zkoumání úlohy nádorového mikroprostředí u karcinomu ledviny a ke studiu buněčných procesů, jako je apoptóza, regulace buněčného cyklu a metastatický potenciál. Jejich reaktivita na hypoxické podmínky je vhodná pro výzkum toho, jak se ccRCC přizpůsobuje prostředí s nízkým obsahem kyslíku, které se nachází v solidních nádorech, a jak v něm prosperuje.

Lze shrnout, že buněčná linie 769-P a další buněčné linie RCC jsou nepostradatelnými nástroji ve výzkumu karcinomu ledviny, které umožňují nahlédnout do patogeneze ccRCC, účinnosti léků a mechanismů rezistence.

Tkáň
Ledviny
Nemoc
Karcinom ledviny
Synonyma
  • 769P
  • 769-p

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Tvoří nádory u imunosuprimovaných křečků a nahých myší
Ploidní stav
Tato buněčná linie měla vysoký počet tetra-, hexa- a vyššíchploidních buněk (2s populace). Nejčastější buněčná populace (32 % buněk) měla pseudodiploidní karyotyp 46,xx,-3,-18,del(7) (q21.12,q22.3), ?t(3q?18q).
Karyotyp
Hypodiploidní. Modální číslo = 45. Ve všech buňkách byl přítomen velký submetacentrický chromozom.
Doba zdvojnásobení
35 hodin

04Identifikátory

Citace
769-P (katalogové číslo Cytion 300106)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1050

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
3 x 104 buněk/cm2 vytvoří během 4 dnů konfluentní monovrstvu.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 48 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
63 let
Etnická příslušnost
Kavkazský