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769-P Células
Pañuelo de papel
Riñón
Enfermedad
Carcinoma de células renales
Sinónimos
769P, 769-p

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769-P Células

Cell line · Número de producto 300106

La línea celular 769-P es una línea celular de carcinoma renal humano (CR) derivada de una muestra obtenida tras una nefrectomía realizada a una paciente de 63 años con ri...

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01Información general

Descripción

La línea celular 769-P es una línea celular humana de carcinoma de células renales (CCR) derivada de una nefrectomía realizada en 1975 a una paciente de 63 años con adenocarcinoma de células renales. Se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer de células renales, en particular en el carcinoma de células renales claras (CCRc), que es la forma más común y letal de cáncer de riñón en adultos.

La línea celular 769-P conserva muchas características del CCR primario y alberga varias mutaciones relevantes para el carcinoma de células renales. Muestran una pérdida de función en el gen supresor de tumores von Hippel-Lindau (VHL), que es un gen de cáncer renal importante en el CCR que puede activar varias vías oncogénicas, incluyendo la angiogénesis, la proliferación celular y la reprogramación metabólica.

La línea celular 769-P se utiliza para comprender los mecanismos moleculares de la patogénesis del cáncer de riñón, explorar la eficacia de los fármacos contra el cáncer e investigar los mecanismos de resistencia a los fármacos. Estas células son particularmente útiles para estudiar la respuesta a los inhibidores de la tirosina quinasa (TKI), que son una clase de terapias dirigidas utilizadas en el tratamiento del CCR y sus subtipos.

La línea celular 769-P de cáncer renal se utiliza además para investigar el papel del microambiente tumoral en el cáncer de riñón y estudiar procesos celulares como la apoptosis, la regulación del ciclo celular y el potencial metastásico. Su capacidad de respuesta a condiciones de hipoxia las hace idóneas para investigar cómo el ccRCC se adapta y prospera en los entornos de bajo oxígeno que se encuentran dentro de los tumores sólidos.

En resumen, la línea celular 769-P y otras líneas celulares de CCR son herramientas indispensables en la investigación del carcinoma renal, ya que proporcionan información sobre la patogénesis del CCR, la eficacia de los fármacos y los mecanismos de resistencia.

Pañuelo de papel
Riñón
Enfermedad
Carcinoma de células renales
Sinónimos
  • 769P
  • 769-p

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tumorigénico
Forma tumores en hámsters inmunodeprimidos y en ratones desnudos
Estado de ploidía
Esta línea celular presentaba un elevado número de células tetra-, hexa- y alto-ploides (poblaciones 2s). La población celular más común (32% de las células) tenía un cariotipo pseudodiploide de 46,xx,-3,-18,del(7) (q21.12,q22.3), ?t(3q?18q).
Cariotipo
Hipodiploide. Número modal = 45. Un gran cromosoma submetacéntrico estaba presente en todas las células.
Tiempo de duplicación
35 horas

04Identificadores

Referencia
769-P (número de catálogo Cytion 300106)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1050

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
3 x 104 células/cm2 darán lugar a una monocapa confluente en 4 días.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 48 horas.
Descongelación y cultivo

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
63 años
Origen étnico
Caucásico