Prejsť na obsah
769-P Bunky
Tkanivo
Obličky
Choroba
Karcinóm z renálnych buniek
Synonymá
769P, 769-p

Dokumenty

769-P Bunky

Cell line · Číslo výrobku 300106

Bunka 769-P je bunková línia karcinómu obličkových buniek (RCC), ktorá bola izolovaná z vzorky odobratej pri nefrektómii u 63-ročnej pacientky s obličkovým...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia 769-P je ľudská bunková línia karcinómu obličky (RCC), ktorá bola získaná zo vzorky nefrektómie 63-ročnej pacientky s adenokarcinómom obličky v roku 1975. Široko sa používa vo výskume karcinómu obličiek, najmä svetlobunkového karcinómu obličiek (ccRCC), ktorý je najčastejšou a najsmrteľnejšou formou karcinómu obličiek u dospelých.

Bunková línia 769-P si zachováva mnohé vlastnosti primárneho RCC a obsahuje niekoľko mutácií, ktoré sú relevantné pre karcinóm z obličkových buniek. Vykazujú stratu funkcie von Hippel-Lindauovho (VHL) tumor supresorového génu, ktorý je dôležitým génom pre karcinóm obličky v ccRCC, ktorý môže aktivovať rôzne onkogénne dráhy vrátane angiogenézy, proliferácie buniek a metabolického preprogramovania.

Bunková línia 769-P sa používa na pochopenie molekulárnych mechanizmov patogenézy rakoviny obličiek, skúmanie účinnosti protinádorových liekov a skúmanie mechanizmov rezistencie na lieky. Tieto bunky sú obzvlášť užitočné na štúdium odpovede na inhibítory tyrozínkinázy (TKI), ktoré sú triedou cielených terapií používaných pri liečbe RCC a podtypov RCC.

Bunková línia rakoviny obličky 769-P sa ďalej používa na skúmanie úlohy nádorového mikroprostredia pri rakovine obličky a na štúdium bunkových procesov, ako je apoptóza, regulácia bunkového cyklu a metastatický potenciál. Vďaka ich reaktivite na hypoxické podmienky sú vhodné na výskum toho, ako sa ccRCC prispôsobuje a rozvíja v prostredí s nízkym obsahom kyslíka, ktoré sa nachádza v solídnych nádoroch.

Celkovo možno konštatovať, že bunková línia 769-P a ďalšie bunkové línie RCC sú nepostrádateľnými nástrojmi vo výskume karcinómu obličky, ktoré poskytujú poznatky o patogenéze ccRCC, účinnosti liekov a mechanizmoch rezistencie.

Tkanivo
Obličky
Choroba
Karcinóm z renálnych buniek
Synonymá
  • 769P
  • 769-p

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Vytvára nádory u imunosuprimovaných škrečkov a nahých myší
Ploidný stav
Táto bunková línia mala vysoký počet tetra-, hexa- a vyššie-ploidných buniek (populácie 2s). Najčastejšia populácia buniek (32 % buniek) mala pseudodiploidný karyotyp 46,xx,-3,-18,del(7) (q21.12,q22.3), ?t(3q?18q).
Karyotyp
Hypodiploid. Modálne číslo = 45. Vo všetkých bunkách bol prítomný veľký submetacentrický chromozóm.
Doba zdvojnásobenia
35 hodín

04Identifikátory

Citácia
769-P (katalógové číslo Cytion 300106)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1050

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
3 x 104 buniek/cm2 vytvorí konfluentnú monovrstvu do 4 dní.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v množstve 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilepiť sa najmenej 48 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
63 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský