Gå til innholdet
769-P Celler
Vev
Nyre
Sykdom
Nyrecellekarsinom
Synonymer
769P, 769-p

Dokumenter

769-P Celler

Cell line · Produktnummer 300106

Cellelinjen 769-P er en cellelinje fra humant nyrecellekarsinom (RCC) som ble isolert fra et nyreeksplantat fra en 63 år gammel kvinnelig pasient med nyre...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

769-P-cellelinjen er en human cellelinje for nyrecellekarsinom (RCC) som ble avledet fra et nefrektomiprøve fra en 63 år gammel kvinnelig pasient med nyrecelleadenokarsinom i 1975. Den er mye brukt i forskning på nyrecellekreft, særlig klarcellet nyrecellekarsinom (ccRCC), som er den vanligste og mest dødelige formen for nyrekreft hos voksne.

769-P-cellelinjen har mange av de samme egenskapene som primær RCC, og den har flere mutasjoner som er relevante for nyrecellekarsinom. De har et funksjonstap i von Hippel-Lindau (VHL)-tumorsuppressorgenet, som er et viktig nyrekreftgen i ccRCC, og som kan aktivere ulike onkogene veier, inkludert angiogenese, celleproliferasjon og metabolsk omprogrammering.

769-P-cellelinjen brukes til å forstå de molekylære mekanismene bak patogenesen ved nyrekreft, utforske effekten av kreftmedisiner og undersøke mekanismene bak legemiddelresistens. Disse cellene er spesielt nyttige for å studere responsen på tyrosinkinasehemmere (TKI-er), som er en klasse av målrettede terapier som brukes i behandlingen av RCC og RCC-undertyper.

769-P-cellelinjen brukes videre til å undersøke hvilken rolle tumormikromiljøet spiller i nyrekreft, og til å studere cellulære prosesser som apoptose, cellesyklusregulering og metastatisk potensial. Cellelinjens respons på hypoksiske forhold gjør den egnet til forskning på hvordan ccRCC tilpasser seg og trives i oksygenfattige miljøer som finnes i solide svulster.

769-P-cellelinjen og andre RCC-cellelinjer er uunnværlige verktøy i nyrekreftforskningen, og gir innsikt i patogenesen ved ccRCC, medikamenteffektivitet og resistensmekanismer.

Vev
Nyre
Sykdom
Nyrecellekarsinom
Synonymer
  • 769P
  • 769-p

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Danner svulster i immunsupprimerte hamstere og i nakne mus
Ploidistatus
Denne cellelinjen hadde et høyt antall tetra-, hexa- og høyereploide celler (2s-populasjoner). Den vanligste cellepopulasjonen (32 % av cellene) hadde en pseudodiploid karyotype på 46,xx,-3,-18,del(7) (q21.12,q22.3), ?t(3q?18q).
Karyotype
Hypodiploid. Modalt antall = 45. Et stort submetacentrisk kromosom var til stede i alle celler.
Fordoblingstid
35 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
769-P (Cytion-katalognummer 300106)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1050

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
3 x 104 celler/cm2 vil resultere i et sammenvokst monolag innen 4 dager.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 48 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
63 år
Etnisitet
Kaukasisk