Przejdź do treści
769-P Komórki
Chusteczka
Nerka
Choroba
Rak nerkowokomórkowy
Synonimy
769P, 769-p

Dokumenty

769-P Komórki

Cell line · Numer produktu 300106

Linia komórkowa 769-P to ludzka linia komórkowa raka nerkowokomórkowego (RCC), wyhodowana z preparatu pobranego podczas nefrektomii u 63-letniej pacjentki z rakiem nerki...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa 769-P to ludzka linia komórkowa raka nerkowokomórkowego (RCC), która została uzyskana z nefrektomii 63-letniej pacjentki z gruczolakorakiem nerkowokomórkowym w 1975 roku. Jest ona szeroko stosowana w badaniach nad rakiem nerkowokomórkowym, w szczególności jasnokomórkowym rakiem nerkowokomórkowym (ccRCC), który jest najczęstszą i najbardziej śmiertelną postacią raka nerki u dorosłych.

Linia komórkowa 769-P zachowuje wiele cech pierwotnego RCC i zawiera kilka mutacji, które są istotne dla raka nerkowokomórkowego. Wykazują one utratę funkcji genu supresorowego nowotworu von Hippel-Lindau (VHL), który jest ważnym genem raka nerki w ccRCC, który może aktywować różne szlaki onkogenne, w tym angiogenezę, proliferację komórek i przeprogramowanie metaboliczne.

Linia komórkowa 769-P jest wykorzystywana do zrozumienia molekularnych mechanizmów patogenezy raka nerki, zbadania skuteczności leków przeciwnowotworowych i zbadania mechanizmów oporności na leki. Komórki te są szczególnie przydatne do badania odpowiedzi na inhibitory kinazy tyrozynowej (TKI), które są klasą terapii celowanych stosowanych w leczeniu RCC i podtypów RCC.

Linia komórkowa raka nerki 769-P jest dalej wykorzystywana do badania roli mikrośrodowiska guza w raku nerki oraz do badania procesów komórkowych, takich jak apoptoza, regulacja cyklu komórkowego i potencjał przerzutowy. Ich wrażliwość na warunki niedotlenienia sprawia, że są one odpowiednie do badań nad tym, jak ccRCC dostosowuje się i rozwija w środowiskach o niskiej zawartości tlenu występujących w guzach litych.

Podsumowując, linia komórkowa 769-P i inne linie komórkowe RCC są niezbędnymi narzędziami w badaniach nad rakiem nerki, zapewniając wgląd w patogenezę ccRCC, skuteczność leków i mechanizmy oporności.

Chusteczka
Nerka
Choroba
Rak nerkowokomórkowy
Synonimy
  • 769P
  • 769-p

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tworzy guzy u chomików poddanych immunosupresji i u nagich myszy
Status ploidii
Ta linia komórkowa miała dużą liczbę komórek tetra-, heksa- i wyżej ploidalnych (populacje 2s). Najczęstsza populacja komórek (32% komórek) miała kariotyp pseudodiploidalny 46,xx,-3,-18,del(7) (q21.12,q22.3), ?t(3q?18q).
Karyotyp
Hipodiploidalny. Liczba modalna = 45. Duży submetacentryczny chromosom był obecny we wszystkich komórkach.
Czas podwojenia
35 godzin

04Identyfikatory

Źródło
769-P (numer katalogowy Cytion 300106)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1050

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
3 x 104 komórek/cm2 spowoduje powstanie zlewającej się monowarstwy w ciągu 4 dni.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 48 godzin, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
63 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski