769-P rakud
Cell line · Toote number 300106
Rakuliin 769-P on inimese neerurakk-kartsinoomi (RCC) rakuliin, mis on saadud 63-aastase naispatsiendi nefrektomiaproovist, kellel oli neeru...
Kohandamine / Soovitused
- 769-P rakudCell line€430.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
Rakuliin 769-P on inimese neerurakukartsinoomi (RCC) rakuliin, mis on saadud 1975. aastal 63-aastase naissoost patsiendi nefrektsiooniproovist, kellel oli neerurakuline adenokartsinoom. Seda kasutatakse laialdaselt neerurakuvähi, eriti selge rakulise neerurakk-kartsinoomi (ccRCC) uurimisel, mis on kõige levinum ja surmavam neeruvähi vorm täiskasvanutel.
Rakuliin 769-P säilitab mitmeid primaarse RCC omadusi ja sisaldab mitmeid mutatsioone, mis on olulised neerurakk-kartsinoomi puhul. Neis esineb von Hippel-Lindau (VHL) tuumori supressorgeeni funktsioonikadu, mis on oluline neeruvähi geen ccRCC puhul, mis võib aktiveerida erinevaid onkogeenseid radu, sealhulgas angiogeneesi, rakkude proliferatsiooni ja ainevahetuse ümberprogrammeerimist.
Rakuliini 769-P kasutatakse neeruvähi patogeneesi molekulaarsete mehhanismide mõistmiseks, vähivastaste ravimite tõhususe uurimiseks ja ravimresistentsuse mehhanismide uurimiseks. Need rakud on eriti kasulikud türosiinkinaasi inhibiitorite (TKI), mis on RCC ja RCC alatüüpide raviks kasutatavate sihtotstarbeliste ravimite klass, vastuse uurimiseks.
Neeruvähi rakuliini 769-P kasutatakse ka selleks, et uurida kasvaja mikrokeskkonna rolli neeruvähis ja uurida selliseid rakuprotsesse nagu apoptoos, rakutsükli regulatsioon ja metastaatiline potentsiaal. Tänu nende tundlikkusele hüpoksiliste tingimuste suhtes on nad sobivad uurimaks, kuidas vähihaigete rakkude rakkude kohanemine ja areng soliidsetes kasvajates leiduvas vähese hapnikusisaldusega keskkonnas on võimalik.
Kokkuvõttes on rakuliin 769-P ja teised RCC rakuliinid asendamatud vahendid neerukartsinoomi uurimisel, andes ülevaate ccRCC patogeneesist, ravimite tõhususest ja resistentsuse mehhanismidest.
- Kude
- Neerud
- Haigus
- Neerurakk-kartsinoom
- Sünonüümid
- 769P
- 769-p
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Tuumorigeenne
- Moodustab kasvajad immunosupresseeritud hamstritel ja alasti hiirtel
- Ploidsus
- Selles rakuliinis oli suur hulk tetra-, heksa- ja kõrgema pluidsusega rakke (2s-populatsioonid). Kõige sagedasem rakupopulatsioon (32% rakkudest) oli pseudodiploidse karüotüübiga 46,xx,-3,-18,del(7) (q21.12,q22.3), ?t(3q?18q).
- Karyotüüp
- Hüpodiploidne. Modaalarv = 45. Kõikides rakkudes oli suur submetatsentriline kromosoom.
- Kahekordistumisaeg
- 35 tundi
04Tunnused
- Viide
- 769-P (Cytioni katalooginumber 300106)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1050
05Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Külvitihedus
- 3 x 104 rakku/cm2 annab 4 päeva jooksul tulemuseks konfluentse monokihi.
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Taastumine pärast sulamist
- Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 48 tunni jooksul.
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
07Annetaja
- Doonori vanus
- 63 aastat
- Etniline kuuluvus
- Kaukaasia
08Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah