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Células 769-P
Tissue
Rim
Disease
Carcinoma de células renais
Synonyms
769P, 769-p

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Células 769-P

Cell line · Product number 300106

The 769-P cell line is a human renal cell carcinoma (RCC) cell line that was derived from a nephrectomy specimen of a 63-year-old female patient with rena...

US$395.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

A linhagem celular 769-P é uma linhagem de carcinoma de células renais (CCR) humana, derivada de uma amostra obtida por nefrectomia de uma paciente de 63 anos com adenocarcinoma de células renais, em 1975. Ela é amplamente utilizada na pesquisa sobre o câncer de células renais, particularmente no carcinoma de células claras (ccRCC), que é a forma mais comum e letal de câncer de rim em adultos.

A linhagem celular 769-P mantém muitas características do RCC primário e apresenta várias mutações relevantes para o carcinoma de células renais. Ela apresenta perda de função no gene supressor de tumor von Hippel-Lindau (VHL), que é um importante gene do câncer renal no ccRCC e pode ativar várias vias oncogênicas, incluindo angiogênese, proliferação celular e reprogramação metabólica.

A linhagem celular 769-P é utilizada para compreender os mecanismos moleculares da patogênese do câncer renal, explorar a eficácia de medicamentos anticâncer e investigar os mecanismos de resistência aos medicamentos. Essas células são particularmente úteis para estudar a resposta aos inibidores da tirosina quinase (TKIs), que são uma classe de terapias direcionadas utilizadas no tratamento do RCC e de seus subtipos.

A linhagem celular de câncer renal 769-P é ainda utilizada para investigar o papel do microambiente tumoral no câncer renal e para estudar processos celulares como a apoptose, a regulação do ciclo celular e o potencial metastático. Sua capacidade de resposta a condições hipóxicas as torna adequadas para pesquisas sobre como o ccRCC se adapta e se desenvolve em ambientes com baixo nível de oxigênio encontrados em tumores sólidos.

Em resumo, a linhagem celular 769-P e outras linhagens de RCC são ferramentas indispensáveis na pesquisa do carcinoma renal, fornecendo insights sobre a patogênese do ccRCC, a eficácia dos medicamentos e os mecanismos de resistência.

Tissue
Rim
Disease
Carcinoma de células renais
Synonyms
  • 769P
  • 769-p

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Tumourigenic
Forma tumores em hamsters imunossuprimidos e em camundongos nude
Ploidy status
Essa linhagem celular apresentava um elevado número de células tetraplóides, hexaplóides e com ploidia superior (populações 2s). A população celular mais comum (32% das células) apresentava um cariótipo pseudodiplóide de 46,xx,-3,-18,del(7) (q21.12,q22.3), ?t(3q?18q).
Karyotype
Hipodiplóide. Número modal = 45. Um grande cromossomo submetacêntrico estava presente em todas as células.
Doubling time
35 horas

04Identifiers

Citation
769-P (número de catálogo da Cytion 300106)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1050

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
3 x 104 células/cm² resultarão em uma monocamada confluente em 4 dias.
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Post-thaw recovery
Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se fixem por pelo menos 48 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

07Donor

Donor age
63 anos
Ethnicity
caucasiano