Pāriet uz saturu
769-P šūnas
Audums
Nieres
Slimība
Nieru šūnu karcinoma
Sinonīmi
769P, 769-p

Dokumenti

769-P šūnas

Cell line · Preces numurs 300106

769-P šūnu līnija ir cilvēka nieru šūnu karcinomas (RCC) šūnu līnija, kas iegūta no 63 gadus vecas sievietes, kurai tika veikta nefrektomija, nieru...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

769-P šūnu līnija ir cilvēka nieru šūnu karcinomas (RCC) šūnu līnija, kas iegūta no 1975. gadā nefrektomijas parauga 63 gadus vecai pacientei ar nieru šūnu adenokarcinomu. To plaši izmanto nieru šūnu vēža, īpaši gaiššūnu nieru šūnu karcinomas (ccRCC), kas ir visizplatītākā un letālākā nieru vēža forma pieaugušajiem, pētījumos.

Šūnu līnija 769-P saglabā daudzas primārās RCC īpašības un satur vairākas mutācijas, kas attiecas uz nieru šūnu karcinomu. Tām piemīt von Hippel-Lindau (VHL) audzēja supresora gēna funkcijas zudums, kas ir svarīgs nieru vēža gēns ccRCC, kurš var aktivizēt dažādus onkogēnus, tostarp angiogenezi, šūnu proliferāciju un metabolisma pārprogrammēšanu.

769-P šūnu līniju izmanto, lai izprastu nieru vēža patoģenēzes molekulāros mehānismus, izpētītu pretvēža zāļu efektivitāti un zāļu rezistences mehānismus. Šīs šūnas ir īpaši noderīgas, lai pētītu atbildes reakciju uz tirozīnkināzes inhibitoriem (TKI), kas ir mērķterapiju grupa, ko izmanto RCC un RCC apakštipu ārstēšanā.

769-P nieru vēža šūnu līniju tālāk izmanto, lai pētītu audzēja mikrovides lomu nieru vēža gadījumā un pētītu tādus šūnu procesus kā apoptoze, šūnu cikla regulācija un metastātiskais potenciāls. Tās spēja reaģēt uz hipoksiskiem apstākļiem padara tās piemērotas pētījumiem par to, kā ccRCC pielāgojas un attīstās zema skābekļa satura vidē, kas sastopama cietos audzējos.

Kopumā 769-P šūnu līnija un citas RCC šūnu līnijas ir neaizstājami instrumenti nieru karcinomas pētniecībā, sniedzot ieskatu ccRCC patoģenēzē, zāļu efektivitātē un rezistences mehānismos.

Audums
Nieres
Slimība
Nieru šūnu karcinoma
Sinonīmi
  • 769P
  • 769-p

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Veido audzējus imūnsupresētiem kāmjiem un kailām pelēm
Ploidijas statuss
Šai šūnu līnijai bija augsts tetra-, heksa- un augstākaploīdu šūnu skaits (2s populācijas). Visbiežāk sastopamajai šūnu populācijai (32 % šūnu) bija pseidodiploīds kariotips 46,xx,-3,-18,del(7) (q21.12,q22.3), ?t(3q?18q).
Kariotips
Hipodiploīdi. Modālais skaits = 45. Visās šūnās bija liela submetacentriska hromosoma.
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
35 stundas

04Identifikatori

Atsauce
769-P (Cytion kataloga numurs 300106)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1050

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
3 x 104 šūnas/cm2 4 dienu laikā veidos konfluentu monoslāni.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
63 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis