AKATA

קו התאים AKATA, שמקורו בלימפומה של בורקיט, הוא מודל נפוץ לחקר רדמת נגיף אפשטיין-בר (EBV) והפעלתו מחדש. EBV הוא נגיף הרפס נפוץ הקשור למגוון סוגי סרטן, כולל לימפומה של בורקיט, ובדרך כלל יוצר זיהום רדום בתאי B. בתאי AKATA, EBV נשמר במצב אפיסומלי עם תוכנית רדמת מסוג I, ומבטא קבוצה מוגבלת של גנים נגיפיים כגון EBNA-1, EBER RNAs ו-BamHI-A rightward transcripts (BARTs). ביטוי גנים מוגבל זה מאפשר לנגיף להישאר במארח מבלי ליזום מחזור ליטי מלא. עם זאת, תאי AKATA יכולים להיות מופעלים כדי להיכנס לשלב הליטי, שבו הנגיף מתרבה באופן פעיל ומייצר צאצאים. הפעלה מחדש זו נגרמת בדרך כלל באמצעות קישור צולב של אימונוגלובולינים על פני השטח, מה שהופך את תאי AKATA לכלי מצוין לחקר הדינמיקה של הפעלה מחדש של EBV וויסות גנים נגיפיים.

מחקרים המשתמשים בקו התאים AKATA בחנו גם את ההשפעה של חומרים כימותרפיים על הפעלה מחדש של EBV. לדוגמה, תרופות כמו אתופוסיד ודוקסורוביצין הוכחו כמשפיעות על רמת הרדמות הנגיף. אתופוסיד גורם לאפופטוזיס בתאי AKATA, אך מפעיל מחדש את EBV בצורה פחות יעילה מדוקסורוביצין, המקדמת רמות גבוהות יותר של ביטוי גנים ליטיים וייצור צאצאים נגיפיים. בנוסף, מחקרים העוסקים בטכניקות עריכת גנים, כגון CRISPR/Cas9, בחנו את תפקידם של רגולטורים אפיגנטיים בתאי AKATA. לדוגמה, נוקאאוט של היסטון מתילטרנספראז EZH2 בתאי AKATA משבש את שמירת הרדמת הנגיף על ידי הפחתת הטרימתילציה של היסטון H3K27, מה שמוביל לעלייה בביטוי של גנים רדומים וליטיים של EBV, כמו גם לשכפול נגיפי מוגבר ולהתרבות תאים.

תאי AKATA מציגים גם מאפיינים פנוטיפיים מובהקים המבוססים על נוכחות EBV, כגון רגישות מוגברת לחומרים המשרים אפופטוזיס וריאציות בביטוי גנים הקשורים למסלולי אפופטוזיס. הבדלים אלה הופכים את תאי AKATA החיוביים ל-EBV למודל רב עוצמה לניתוח השפעת EBV על הישרדות תאי המארח, ביטוי גנים ומחזור החיים של הנגיף, במיוחד בהקשר של התפתחות סרטן והתערבויות טיפוליות פוטנציאליות המכוונות לגידולים ממאירים הקשורים ל-EBV.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו