AKATA

Garis sel AKATA, yang berasal dari limfoma Burkitt, adalah model yang banyak digunakan untuk mempelajari laten dan reaktivasi virus Epstein-Barr (EBV). EBV adalah virus herpes yang ada di mana-mana yang terkait dengan berbagai jenis kanker, termasuk limfoma Burkitt, dan biasanya menimbulkan infeksi laten di dalam sel B. Dalam sel AKATA, EBV dipertahankan dalam keadaan episomal dengan program latensi tipe I, yang mengekspresikan sekumpulan gen virus yang terbatas seperti EBNA-1, EBER RNA, dan transkrip ke kanan BamHI-A (BART). Ekspresi gen yang terbatas ini memungkinkan virus untuk bertahan di dalam inang tanpa memulai siklus litik penuh. Namun, sel AKATA dapat dipicu untuk memasuki fase litik, di mana virus secara aktif bereplikasi dan menghasilkan keturunan. Pengaktifan kembali ini biasanya diinduksi melalui imunoglobulin permukaan yang menghubungkan silang, yang menjadikan sel AKATA alat yang sangat baik untuk mempelajari dinamika reaktivasi EBV dan regulasi gen virus.

Penelitian yang menggunakan garis sel AKATA juga telah meneliti dampak agen kemoterapi pada reaktivasi EBV. Misalnya, obat-obatan seperti etoposide dan doksorubisin telah terbukti memengaruhi latensi virus. Etoposide menginduksi apoptosis pada sel AKATA tetapi mengaktifkan kembali EBV kurang efektif dibandingkan doksorubisin, yang mendorong tingkat ekspresi gen litik dan produksi keturunan virus yang lebih tinggi. Selain itu, penelitian yang melibatkan teknik pengeditan gen, seperti CRISPR/Cas9, telah mengeksplorasi peran regulator epigenetik dalam sel AKATA. Sebagai contoh, KO dari histone methyltransferase EZH2 pada sel AKATA mengganggu pemeliharaan latensi dengan mengurangi trimetilasi histone H3K27, yang menyebabkan peningkatan ekspresi gen EBV laten dan litik, serta peningkatan replikasi virus dan proliferasi sel.

Sel AKATA juga menunjukkan karakteristik fenotipik yang berbeda berdasarkan keberadaan EBV, seperti peningkatan sensitivitas terhadap agen pemicu apoptosis dan variasi ekspresi gen yang terkait dengan jalur apoptosis. Perbedaan-perbedaan ini menjadikan sel AKATA yang positif EBV sebagai model yang kuat untuk membedah pengaruh EBV terhadap kelangsungan hidup sel inang, ekspresi gen, dan siklus hidup virus, terutama dalam konteks perkembangan kanker dan intervensi terapeutik potensial yang menargetkan keganasan terkait EBV.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami