AKATA

A Burkitt-limfómából származó AKATA sejtvonal széles körben használt modell az Epstein-Barr-vírus (EBV) latenciájának és reaktiválásának tanulmányozására. Az EBV egy mindenütt jelenlévő herpeszvírus, amely számos rákos megbetegedéshez, köztük a Burkitt-limfómához is kapcsolódik, és jellemzően látens fertőzést hoz létre a B-sejtekben. Az AKATA sejtekben az EBV epizomális állapotban marad, I-es típusú latenciaprogrammal, amely a vírusgének korlátozott készletét, például az EBNA-1-et, az EBER RNS-eket és a BamHI-A jobbra irányuló transzkriptumokat (BART) expresszálja. Ez a korlátozott génexpresszió lehetővé teszi a vírus számára, hogy a teljes lítikus ciklus beindítása nélkül fennmaradjon a gazdaszervezetben. Az AKATA sejtek azonban kiválthatják a lítikus fázisba való belépést, ahol a vírus aktívan szaporodik és utódokat termel. Ezt a reaktiválódást általában a felületi immunglobulinok keresztkötésével indukálják, ami az AKATA sejteket kiváló eszközzé teszi az EBV reaktiválódási dinamikájának és a vírus génszabályozásának tanulmányozására.

Az AKATA sejtvonalat használó kutatások a kemoterápiás szereknek az EBV reaktiválódásra gyakorolt hatását is vizsgálták. Kimutatták például, hogy az olyan gyógyszerek, mint az etopozid és a doxorubicin befolyásolják a vírus latenciáját. Az etopozid apoptózist indukál az AKATA sejtekben, de kevésbé hatékonyan reaktiválja az EBV-t, mint a doxorubicin, amely elősegíti a lítikus génexpresszió magasabb szintjét és a vírus utódok termelését. Emellett génszerkesztési technikákat, például a CRISPR/Cas9-et alkalmazó tanulmányok az epigenetikai szabályozók szerepét vizsgálták az AKATA sejtekben. Például a hiszton-metiltranszferáz EZH2 kiütése AKATA sejtekben megzavarja a latencia fenntartását azáltal, hogy csökkenti a H3K27 hiszton trimetilációját, ami mind a látens, mind a lítikus EBV-gének fokozott expressziójához, valamint fokozott vírusreplikációhoz és sejtproliferációhoz vezet.

Az AKATA sejtek az EBV jelenléte alapján eltérő fenotípusos jellemzőket is mutatnak, mint például az apoptózist indukáló szerekkel szembeni fokozott érzékenység és az apoptotikus útvonalakhoz kapcsolódó génexpresszió eltérései. Ezek a különbségek az EBV-pozitív AKATA sejteket hatékony modellé teszik az EBV-nek a gazdasejtek túlélésére, a génexpresszióra és a vírus életciklusára gyakorolt hatásának feltárására, különösen a rák kialakulásával és az EBV-vel összefüggő rosszindulatú daganatos betegségeket célzó lehetséges terápiás beavatkozásokkal összefüggésben.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban