AKATA

AKATA-cellinjen, som härrör från Burkitts lymfom, är en ofta använd modell för att studera latens och reaktivering av Epstein-Barr-virus (EBV). EBV är ett allmänt förekommande herpesvirus som är kopplat till en rad olika cancerformer, däribland Burkitts lymfom, och som vanligtvis etablerar en latent infektion i B-celler. I AKATA-celler upprätthålls EBV i ett episomalt tillstånd med ett latensprogram av typ I, som uttrycker en begränsad uppsättning virusgener som EBNA-1, EBER-RNA och BamHI-A rightward transcripts (BART). Detta begränsade genuttryck gör att viruset kan leva kvar i värden utan att initiera en fullständig lytisk cykel. AKATA-celler kan dock aktiveras så att de går in i den lytiska fasen, där viruset aktivt replikerar och producerar avkomma. Denna reaktivering induceras vanligen genom korsbindning av ytimmunoglobuliner, vilket gör AKATA-celler till ett utmärkt verktyg för att studera EBV-reaktiveringsdynamik och viral genreglering.

I forskning med AKATA-cellinjen har man också undersökt hur kemoterapeutiska medel påverkar reaktiveringen av EBV. Exempelvis har läkemedel som etoposid och doxorubicin visat sig påverka den virala latensen. Etoposid framkallar apoptos i AKATA-celler men reaktiverar EBV mindre effektivt än doxorubicin, som främjar högre nivåer av lytiskt genuttryck och produktion av virala progenier. Dessutom har studier som involverar genredigeringstekniker, såsom CRISPR/Cas9, utforskat de epigenetiska regulatorernas roll i AKATA-celler. Till exempel stör knockout av histonmetyltransferaset EZH2 i AKATA-celler upprätthållandet av latens genom att minska trimetyleringen av histon H3K27, vilket leder till ökat uttryck av både latenta och lytiska EBV-gener samt ökad virusreplikation och cellproliferation.

AKATA-celler uppvisar också distinkta fenotypiska egenskaper beroende på EBV-förekomst, t.ex. ökad känslighet för apoptosframkallande medel och variationer i genuttryck relaterade till apoptosvägar. Dessa skillnader gör EBV-positiva AKATA-celler till en kraftfull modell för att dissekera EBV:s påverkan på värdcellens överlevnad, genuttryck och virusets livscykel, särskilt i samband med cancerutveckling och potentiella terapeutiska interventioner riktade mot EBV-associerade maligniteter.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring