AKATA

A linha celular AKATA, derivada do linfoma de Burkitt, é um modelo amplamente utilizado para estudar a latência e a reativação do vírus Epstein-Barr (EBV). O EBV é um herpesvírus ubíquo ligado a uma série de cancros, incluindo o linfoma de Burkitt, e estabelece normalmente uma infeção latente nas células B. Nas células AKATA, o EBV é mantido num estado epissomal com um programa de latência do tipo I, expressando um conjunto limitado de genes virais, como o EBNA-1, os RNAs EBER e os transcritos BamHI-A para a direita (BARTs). Esta expressão genética restrita permite que o vírus persista no hospedeiro sem iniciar um ciclo lítico completo. No entanto, as células AKATA podem ser activadas para entrar na fase lítica, em que o vírus se replica ativamente e produz descendentes. Esta reativação é normalmente induzida através da ligação cruzada de imunoglobulinas de superfície, o que faz das células AKATA uma excelente ferramenta para estudar a dinâmica da reativação do EBV e a regulação dos genes virais.

A investigação que utiliza a linha celular AKATA também examinou o impacto dos agentes quimioterapêuticos na reativação do EBV. Por exemplo, foi demonstrado que fármacos como o etoposido e a doxorrubicina influenciam a latência viral. O etoposido induz a apoptose nas células AKATA, mas reactiva o EBV de forma menos eficaz do que a doxorrubicina, que promove níveis mais elevados de expressão de genes líticos e de produção de descendentes virais. Além disso, estudos envolvendo técnicas de edição de genes, como CRISPR/Cas9, exploraram o papel dos reguladores epigenéticos nas células AKATA. Por exemplo, a eliminação da histona metiltransferase EZH2 nas células AKATA perturba a manutenção da latência, reduzindo a trimetilação da histona H3K27, o que leva a um aumento da expressão dos genes latentes e líticos do EBV, bem como a uma maior replicação viral e proliferação celular.

As células AKATA também apresentam caraterísticas fenotípicas distintas com base na presença do EBV, tais como uma maior sensibilidade a agentes indutores de apoptose e variações na expressão de genes relacionados com as vias apoptóticas. Estas diferenças fazem das células AKATA EBV-positivas um modelo poderoso para dissecar a influência do EBV na sobrevivência das células hospedeiras, na expressão genética e no ciclo de vida do vírus, particularmente no contexto do desenvolvimento do cancro e de potenciais intervenções terapêuticas dirigidas a doenças malignas associadas ao EBV.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia