AKATA

เซลล์ไลน์ AKATA ซึ่งได้มาจากมะเร็งต่อมน้ำเหลืองของ Burkitt เป็นแบบจำลองที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการศึกษาการแฝงและการกระตุ้นของไวรัส Epstein-Barr (EBV) EBV เป็นไวรัสเฮอร์ปีสที่พบได้ทั่วไปและเชื่อมโยงกับมะเร็งหลายชนิด รวมถึงมะเร็งต่อมน้ำเหลืองของ Burkitt และมักก่อให้เกิดการติดเชื้อแบบแฝงภายในเซลล์บีในเซลล์ AKATA, EBV จะคงอยู่ในสถานะ episomal พร้อมกับโปรแกรม latency ประเภท I โดยแสดงออกของยีนไวรัสเพียงชุดจำกัด เช่น EBNA-1, EBER RNAs, และ BamHI-A rightward transcripts (BARTs) การแสดงออกของยีนที่จำกัดนี้ช่วยให้ไวรัสสามารถคงอยู่ในโฮสต์ได้โดยไม่ต้องเริ่มวงจร lytic อย่างสมบูรณ์อย่างไรก็ตาม เซลล์ AKATA สามารถถูกกระตุ้นให้เข้าสู่ระยะไลติก ซึ่งไวรัสจะทำการจำลองตัวเองอย่างแข็งขันและผลิตเชื้อไวรัสลูกหลาน การกระตุ้นนี้มักเกิดขึ้นผ่านการเชื่อมโยงข้ามของอิมมูโนโกลบูลินบนพื้นผิว ซึ่งทำให้เซลล์ AKATA เป็นเครื่องมือที่ยอดเยี่ยมในการศึกษาพลวัตของการกระตุ้น EBV และการควบคุมยีนของไวรัส

งานวิจัยที่ใช้เซลล์ไลน์ AKATA ยังได้ศึกษาผลกระทบของสารเคมีบำบัดต่อการกระตุ้นเชื้อ EBV อีกด้วย ตัวอย่างเช่น ยาอย่างเอโทโพไซด์และโดโซรูบิซินได้แสดงให้เห็นว่ามีผลต่อการพักตัวของไวรัส เอโทโพไซด์กระตุ้นการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสในเซลล์ AKATA แต่กระตุ้นเชื้อ EBV ได้น้อยกว่าโดโซรูบิซิน ซึ่งส่งเสริมการแสดงออกของยีนไลติกและผลิตเชื้อไวรัสในระดับที่สูงกว่านอกจากนี้ การศึกษาที่เกี่ยวข้องกับเทคนิคการแก้ไขยีน เช่น CRISPR/Cas9 ได้สำรวจบทบาทของตัวควบคุมอีพีเจเนติกในเซลล์ AKATA ตัวอย่างเช่น การกำจัดยีน histone methyltransferase EZH2 ในเซลล์ AKATA จะรบกวนการคงสภาพของการแฝงตัวโดยการลดการเติมหมู่เมทิลสามหมู่ของฮิสโตน H3K27 ส่งผลให้มีการแสดงออกของยีน EBV ทั้งแบบแฝงและแบบไลติกเพิ่มขึ้น รวมถึงการเพิ่มการจำลองแบบของไวรัสและการเพิ่มจำนวนเซลล์

เซลล์ AKATA ยังแสดงลักษณะทางฟีโนไทป์ที่แตกต่างอย่างชัดเจนตามการมีอยู่ของเชื้อ EBV เช่น ความไวที่เพิ่มขึ้นต่อสารเหนี่ยวนำการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส และความแปรผันในการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับเส้นทางการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส ความแตกต่างเหล่านี้ทำให้เซลล์ AKATA ที่มีเชื้อ EBV เป็นแบบจำลองที่มีประสิทธิภาพสำหรับการวิเคราะห์อิทธิพลของเชื้อ EBV ต่อการอยู่รอดของเซลล์เจ้าบ้าน การแสดงออกของยีน และวัฏจักรชีวิตของไวรัส โดยเฉพาะอย่างยิ่งในบริบทของการพัฒนาโรคมะเร็งและการแทรกแซงทางบำบัดที่อาจมุ่งเป้าไปที่มะเร็งที่เกี่ยวข้องกับเชื้อ EBV

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.