AKATA

バーキットリンパ腫由来のAKATA細胞株は、エプスタイン・バーウイルス（EBV）の潜伏と再活性化を研究するモデルとして広く用いられている。EBVは、バーキットリンパ腫を含む様々な癌に関連するユビキタスヘルペスウイルスであり、通常、B細胞内に潜伏感染を確立する。AKATA細胞においてEBVは、EBNA-1、EBER RNA、BamHI-A右方転写産物（BARTs）などの限定されたウイルス遺伝子を発現するI型潜伏プログラムを持つエピソーム状態で維持される。この制限された遺伝子発現により、ウイルスは完全な溶解サイクルを開始することなく、宿主内で持続することができる。しかし、AKATA細胞は、ウイルスが活発に複製し子孫を生産する溶解期に入るきっかけを作ることができる。この再活性化は、一般的に表面免疫グロブリンの架橋によって誘導されるため、AKATA細胞はEBVの再活性化の動態やウイルス遺伝子の制御を研究するための優れたツールとなっている。

AKATA細胞株を用いた研究では、EBVの再活性化に対する化学療法剤の影響も調べられている。例えば、エトポシドやドキソルビシンのような薬剤がウイルス潜伏期に影響を与えることが示されている。エトポシドはAKATA細胞にアポトーシスを誘導するが、EBVを再活性化する効果はドキソルビシンよりも低く、溶解性遺伝子の発現とウイルス子孫の産生をより高レベルで促進する。さらに、CRISPR/Cas9のような遺伝子編集技術を用いた研究では、AKATA細胞におけるエピジェネティック制御因子の役割が探求されている。例えば、AKATA細胞におけるヒストンメチル化酵素EZH2のノックアウトは、ヒストンH3K27のトリメチル化を減少させることによって潜伏期の維持を破壊し、潜伏性EBV遺伝子と溶解性EBV遺伝子の両方の発現を増加させるだけでなく、ウイルスの複製と細胞増殖を亢進させる。

AKATA細胞はまた、アポトーシス誘導剤に対する感受性の増加やアポトーシス経路に関連する遺伝子発現の変動など、EBVの存在に基づく明確な表現型の特徴を示す。このような違いから、EBV陽性AKATA細胞は、宿主細胞の生存、遺伝子発現、ウイルスのライフサイクルに対するEBVの影響を解明するための強力なモデルであり、特に癌の発生やEBV関連悪性腫瘍を標的とした治療介入の可能性との関連において重要である。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。